BUDAYA DARAH: UNTUK APA, RASIONAL, PROSEDUR, HASIL - BIOLOGI - 2025

The budaya darah adalah ujian bakteriologi yang bertujuan untuk mengesan kehadiran mikroorganisma dalam darah. Darah adalah cecair yang steril secara semula jadi dan oleh itu mesti disimpan dalam keadaan fisiologi, jadi kehadiran bakteria atau kulat dalam darah selalu bersifat patologi.

Apabila bakteria atau kulat terdapat di dalam darah, tetapi pendaraban tidak melebihi penghapusan mikroorganisma oleh sistem imun, ia disebut bakteremia (untuk bakteria) atau fungemia (untuk kulat); Tetapi jika jumlah mikroorganisma meningkat secara tidak terkawal, ia disebut septikemia.

Botol kultur darah (kuning: aerobiosis pediatrik, hijau: aerobiosis dewasa, dan merah: anaerobiosis dewasa). Sumber: gambar yang diambil oleh pengarang MSc Marielsa Gil.

Bakteria, fungemia dan septikemia membahayakan nyawa pesakit dan oleh itu mesti dirawat dengan segera. Itulah sebabnya, ketika ada kecurigaan infeksi dalam darah, dokter meminta studi budaya darah.

Analisis bakteriologi ini dapat mengetahui sama ada terdapat jangkitan dalam darah atau tidak dan mikroorganisma yang terlibat. Selain itu, jika positif, tes kepekaan dilakukan untuk mengetahui antibiotik atau antijamur mana yang dapat digunakan dalam perawatan.

Sekiranya, sebaliknya, kultur darah negatif pada inkubasi 24 jam, ia tidak boleh dibuang sehingga negatif selama 240 jam. Ini memastikan bahawa tidak ada mikroorganisma yang lambat tumbuh.

Agar kultur darah dapat dipercayai, langkah-langkah aseptik yang melampau mesti diambil ketika mengambil sampel, dan untuk meningkatkan kebolehpercayaan dan kepekaan ujian, minimum dua sampel harus diambil selama atau dekat puncak demam.

Untuk apa itu?

Darah adalah cecair steril dan apabila mikroorganisma dijumpai di dalamnya ia 100% patologi. Keadaan ini menggambarkan gambaran klinikal yang sangat halus yang membahayakan kehidupan pesakit.

Budaya darah adalah ujian bakteriologi penting yang mengesan kehadiran mikroorganisma dalam aliran darah.

Mikroorganisma dapat mencapai darah melalui jalan yang berbeza, yang boleh menjadi jangkitan ekstravaskular seperti: radang paru-paru, jangkitan intra-perut, pielonefritis, jangkitan serius pada kulit, tisu lembut atau arthritis.

Atau boleh juga secara intravena, misalnya, pencemaran kateter intravena atau arteri, endokarditis, ketagihan ubat intravena, pemberian ubat atau penyelesaian yang tercemar, dll.

Mengesan dan merawat agen penyebab sepsis tepat pada waktunya adalah penting untuk memastikan kelangsungan hidup pesakit.

Dalam pengertian ini, doktor harus menunjukkan kesedaran budaya darah ketika dia memerhatikan tanda-tanda dan gejala yang menunjukkan septikemia, seperti: demam (lebih besar daripada 38 ° C) tanpa fokus menular yang jelas atau, sebaliknya, hipotermia (<de 36 ° C).

Tanda-tanda lain mungkin: menggigil, peningkatan jumlah sel darah putih (> 10,000 sel / mm ³ ) atau penurunan ketara dalam sel polimorfonuklear (<1,000 PMN / mm ³ ). Serta kemerosotan atau kehilangan daya hidup multiorgan secara tiba-tiba, antara tanda-tanda amaran lain.

Bakteria boleh berterusan, sementara, atau sekejap-sekejap. Ini penting semasa mengambil sampel, kerana perlu diambil ketika ada kemungkinan besar kemungkinan mikroorganisma beredar.

Oleh itu, disyorkan untuk mengambil sekurang-kurangnya 2 sampel di tempat yang berbeza. Di samping itu, yang ideal adalah sampel diambil pada puncak demam atau ketika pesakit mengalami gegaran, hipotermia ekstrem, berpeluh atau takikardia.

Namun, agar kultur darah menjadi alat yang sangat berguna, sampel mesti diambil dengan berhati-hati. Manipulasi yang buruk atau asepsis yang buruk pada saat mengambil sampel boleh membatalkan ujian dan memperoleh positif palsu.

Asas

Kajian ini terdiri daripada mengambil dua atau tiga sampel darah secara aseptik dan memasukkannya ke dalam botol khas.

Peranti khas untuk mengolah sampel darah disebut botol kultur darah. Ini dikelaskan kepada:

Mengikut usia pesakit

-Penggunaan kanak-kanak

-Untuk orang dewasa.

Mengikut jenis mikroorganisma

-Flasks untuk mikroorganisma aerobik (bakteria aerobik, bakteria fakultatif dan kulat).

-Botol kultur darah untuk mikroorganisma anaerob (bakteria anaerobik yang ketat).

Sebahagiannya mengandungi medium kultur cecair dan sebahagian lagi mengandungi medium kultur cair dan cair pada masa yang sama. Mereka juga wujud dengan zarah karbon aktif.

Proses

Cadangan untuk persampelan

- Sampel yang akan diambil oleh pegawai yang terlatih dan terlatih di bidang mikrobiologi.

- Asepsis atau pembersihan menyeluruh dari laman pengumpulan sampel pasti merupakan langkah yang paling penting.

- Seperti semua persampelan, pegawai kesihatan mesti mematuhi sepenuhnya langkah-langkah biosafety semasa proses (penggunaan sarung tangan, gaun, cermin mata, antara lain).

- Pastikan semua alat yang diperlukan untuk mengambil sampel tersedia.

- Labelkan botol dengan nama penuh, tarikh, nombor rekod perubatan, masa pengambilan sampel, dan nombor urutan makmal pesakit.

-Sebaiknya, sampel diambil sebelum pesakit memulakan terapi antimikroba. Ini hanya ditunjukkan dalam kasus yang disyaki bahawa rawatan yang tidak berfungsi sedang dicurigai. Dalam kes ini, sampel harus diambil sebelum ubat berubah, menggunakan botol kultur darah dengan perencat antibiotik (zarah karbon aktif).

- Sekurang-kurangnya 2 sampel mesti diambil di laman anatomi yang berbeza, seperti lengan kanan dan lengan kiri. Pada endokarditis yang disyaki, 3 sampel disyorkan. Dua botol akan disertakan dalam setiap sampel (satu untuk aerobiosis dan satu untuk anaerobiosis).

Kuantiti sampel

Jumlah sampel berbeza mengikut usia pesakit, tetapi nisbah 1: 5 hingga 1:10 harus selalu dipertahankan sehubungan dengan pencairan kaldu darah / kultur.

Pada bayi baru lahir, kuantiti sampel yang disyorkan adalah 1 ml darah setiap botol. Botol pediatrik digunakan.

Dalam kes bayi antara satu bulan dan satu tahun, bayi dapat meningkat menjadi 1,5 ml darah setiap botol. Botol pediatrik digunakan.

Pada kanak-kanak yang berumur lebih dari 2 tahun jumlah sampel yang sesuai ialah 2.5 ml darah setiap botol. Botol pediatrik digunakan.

Sejak remaja ia boleh meningkat menjadi jumlah darah antara 5 - 10 ml setiap botol. Sebotol dewasa digunakan.

Akhirnya, pada peringkat dewasa, jumlah yang diperlukan ialah 8-10 ml setiap botol. Sebotol dewasa digunakan.

Persampelan

- Sampel darah boleh menjadi vena atau arteri. Walau bagaimanapun, darah arteri diambil hanya apabila pengambilan vena tidak mungkin dilakukan.

- Tidak digalakkan mengambil sampel dari kateter vena pusat kecuali:

1. Tidak mungkin mengambil sampel secara periferal (vena atau arteri).
2. Pesakit berisiko mengalami pendarahan.
3. Apabila doktor mengesyaki bakteremia kerana pencemaran kateter vena pusat.
4. Apabila demam muncul semula setelah pemberhentian demam selama 4 hingga 5 hari, tidak kira pesakit menjalani rawatan antimikroba atau tidak.

Asepsis sebelum mengambil sampel

- Pilih laman anatomi untuk pengambilan sampel. Secara amnya, urat berkaliber terbaik dipilih (basil atau cephalic vein).

- Menurut Pusat Pengendalian Penyakit (CDC) di Atlanta (AS), pengendali mesti mencuci tangan dengan 2% chlorhexidine atau 10% povidone iodine sebelum mengambil sampel, selain memakai sarung tangan.

-Palpate dan cari urat yang akan digunakan.

-Bersihkan kawasan tusukan secara berputar, buat pergerakan dari pusat ke luar menggunakan sabun chlorhexidine atau sabun antiseptik. Bilas dengan garam steril.

Selepas itu, sapukan antiseptik dan biarkan ia bertindak. Contoh chlorhexidine gluconate 0.5% selama 1 minit atau povidone iodine 10% selama 2 minit. Untuk yang terakhir, tanyakan terlebih dahulu jika pesakit alah kepada yodium. Sekiranya anda alah, anda boleh menggantikan alkohol 70%.

Pengambilan sampel

- Letakkan tourniquet untuk memperburuk aliran darah dan mengeluarkan urat.

- Jangan sentuh tapak tusukan dengan jari anda lagi. Sekiranya ini sangat diperlukan, jari harus dicuci dengan cara yang sama seperti kawasan tusukan.

-Masukkan jarum penyuntik atau kulit kepala ke dalam vena dan keluarkan jumlah darah yang diperlukan.

-Jangan meletakkan kapas atau kain kasa pada jarum semasa mengeluarkannya jika tidak steril.

-Keluarkan penutup keselamatan dari botol dengan sangat berhati-hati dan tanpa menyentuh penutupnya. Sebilangan penulis mengesyorkan melakukan pembasmian kuman sebelum menyuntik sampel.

- Sebarkan jumlah darah yang sesuai di dalam botol. Sekiranya sampel diambil dengan penyuntik, kuantiti yang diperlukan terlebih dahulu dituangkan ke dalam labu anaerob dan kemudian ke dalam labu aerobik. Sekiranya pengambilannya dilakukan dengan kulit kepala (rama-rama) dituangkan dengan cara yang bertentangan.

- Campurkan botol kultur darah dengan perlahan secara terbalik.

- Tukar sarung tangan dan ulangi langkah sebelumnya untuk koleksi sampel kedua.

-Jika sampel kedua diambil dari laman web yang lain, ia dapat dilakukan dengan segera, tetapi jika ia dari laman web yang sama, anda mesti menunggu 30 hingga 90 minit antara satu sampel dengan sampel yang lain.

- Sampel harus dibawa ke makmal secepat mungkin, jika ini tidak mungkin, ia harus dibiarkan pada suhu bilik maksimum 18 jam.

Budaya

Sekali di makmal, termos diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam keadaan setiap termos, masing-masing, dalam aerobiosis dan anaerobiosis.

Di bawah kaedah manual, dering harus dimulakan pada 24 jam inkubasi dan kemudian berdering setiap hari. Cincin dilakukan seperti berikut: pertama penutup botol dibasmi kuman dan jarum penyuntik steril dimasukkan. Cecair diekstrak dari termos dan disemai pada agar darah dan agar coklat.

Sekiranya terdapat pertumbuhan, Gram dilakukan, subkultur dalam media tertentu, ujian biokimia dan antibiogram.

Dalam kaedah automatik peralatan Bact / Alert memancarkan penggera apabila mengesan botol itu positif. Dengan cara yang sama, ia mesti diketuk pada agar darah dan agar coklat.

Kaedah lain yang semakin meningkat adalah dengan menganalisis labu setelah 6 jam inkubasi melalui spektrometri massa. Kaedah ini telah membantu meningkatkan kepekaan dan kepantasan diagnosis.

Keputusan

Selagi botol kultur darah negatif, laporan pertengahan awal dapat diberikan kepada doktor yang merawat. Laporan menunjukkan bahawa ia negatif pada jam-jam yang telah diinkubasi. Contohnya, jika berlaku negatif hingga hari keempat, ia akan dilaporkan seperti berikut:

Hasil awal: budaya negatif pada inkubasi 96 jam.

Catatan: kajian berterusan selama 240 jam.

Sekiranya kultur darah positif, doktor yang merawat segera diberitahu dan laporan dihantar dengan sekurang-kurangnya gram koloni. Contoh:

Hasil awal: dalam kultur positif pada 48 jam inkubasi, gram basil negatif dan oksidase negatif diperhatikan. Ujian pengenalan dan kepekaan sedang dalam proses.

Maklumat ini memberi petunjuk kepada doktor yang merawat untuk memulakan terapi empirikal terhadap kemungkinan mikroorganisma, sementara menunggu hasil akhir makmal.

Setelah menyelesaikan kajian bakteriologi, iaitu mikroorganisma telah dikenal pasti dan antibiogram tersedia, laporan akhir harus dihantar secepat mungkin.

Perhatian khusus harus diambil sekiranya organisma sasaran adalah Neisseria gonorrhoeae atau Neisseria meningitidis, kerana bakteria ini dihambat dengan adanya kepekatan natrium polyanethosulfonate (SPS) yang tinggi.

Itulah sebabnya sebatian ini tidak boleh melebihi 0.025% dalam botol kultur darah.

Sebaliknya, jika sampel kultur darah pertama kali diambil dalam tabung Vacutainer, tabung ini mempunyai kepekatan SPS toksik kepada meningokokus dan gonokokus, jadi darah harus dipindahkan dalam waktu 1 jam ke sistem kultur kaldu.

Bagaimana untuk mengetahui sama ada budaya darah positif atau pencemaran

Kultur darah dianggap tercemar apabila terdapat pertumbuhan hanya dalam satu botol kultur darah dari jumlah yang diambil. Dan kecurigaan pencemaran meningkat jika mikroorganisma terpencil adalah mikrobiota kulit normal: contoh: coagulase negatif Staphylococcus, Propionibacterium spp, antara lain.

Walau bagaimanapun, pada pesakit dengan imunokompromi, tidak ada mikroorganisma yang harus diabaikan, tetapi dalam hal ini mikroorganisma harus muncul dalam beberapa sampel.

Sebaliknya, jika kepekaan terhadap antibiotik mikroorganisma yang sama yang diasingkan dalam dua sampel berbeza adalah sama, jangkitannya adalah nyata.

Ciri lain adalah beban bakteria, kerana kultur darah yang tercemar tumbuh lambat, sementara jangkitan sebenar pada pesakit yang tidak dirawat secara amnya positif pada inkubasi 14 jam ketika mikroorganisma tidak mengganggu.

Sebaliknya, pada pesakit yang dirawat dengan antimikroba mikroorganisma yang terlibat mungkin memerlukan masa untuk berkembang kerana bebannya sangat rendah.

Kemunculan lebih dari satu mikroorganisma mungkin menunjukkan pencemaran, tetapi jika hasil yang sama diulang dalam beberapa tembakan dari laman web yang berlainan, maka itu nyata.

Rujukan

1. "Budaya darah." Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 3 Jul 2019, 17:28 UTC. 14 Jul 2019, 19:05 id.wikipedia.org
2. Hervé B. Teknologi baru dalam diagnosis mikrobiologi: automasi dan beberapa aplikasi dalam kajian identifikasi dan kerentanan mikrob. Pendeta Med. Clin. Mengira. 2015; 26 (6) 753-763. Terdapat di: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. Bab 20: Sepsis dan risiko penyakit kardiovaskular. Kesihatan kardiovaskular. hlm 187-194. Terdapat di: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Budaya darah: Apa yang mereka katakan kepada anda dan apa yang anda lakukan? Sakit glob. 2012; 11 (26): 146-163. Terdapat di: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Kebarangkalian kejayaan memperoleh budaya darah positif. Med. Interna Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Terdapat di: scielo.org