MEDIUM STUART: ASAS, PENYEDIAAN DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2026

Yang sederhana Stuart ialah agar separuh pepejal atau sup tanpa nutrien, yang digunakan untuk pengangkutan sampel biologi. Tujuannya adalah untuk memastikan ketegangan yang terdapat dalam sampel dapat bertahan untuk waktu tertentu, tetapi tanpa meningkatkan populasi mikroba.

Ia dicipta oleh Moffet, Young, dan Stuart pada tahun 1948 dan kemudian diubah suai oleh Toshach dan Patsula. Ia terdiri daripada natrium gliserofosfat, natrium tioglikolat, kalsium klorida dan agar-agar. Yang terakhir terdapat dalam medium separa pepejal dan tidak terdapat dalam cecair. Beberapa makmal menambah biru metilena ke dalamnya.

Culturette dengan pengangkutan Stuart. Sumber: Oleh: CDC / Dr. Gilda Jones, Dengan hormat: Perpustakaan Imej Kesihatan Awam

Mereka biasanya digunakan apabila tidak mungkin menabur sampel dengan segera. Dalam kes ini, sampel diletakkan di media pengangkutan, sementara sampel dipindahkan ke makmal yang akan memproses kultur.

Dengan cara ini, dijamin bahawa mikroorganisma yang ada tetap hidup sehingga diinokulasi dalam media kultur yang sesuai.

Pada mulanya, penggunaannya bertujuan untuk mengangkut sampel uretra atau vagina di mana disyaki adanya Neisseria gonorrhoeae. Kemudian, mereka menyedari bahawa kegunaannya lebih luas.

Media Stuart ternyata sangat cekap dalam pemeliharaan mikroorganisma labil dan cepat seperti Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, antara lain. Sebagai tambahan kepada mikroorganisma lain yang tidak menjengkelkan seperti Enterobacteria.

Medium Stuart pada dasarnya mencegah pengeringan sampel, mengekalkan keseimbangan osmotik dan memelihara mikroorganisma pada pH yang ideal. Sebaliknya, secara strategik media ini tidak mengandungi nutrien, sehingga mencegah mikroorganisma membiak.

Di pasar ada alat pengangkutan sampel khusus yang mengandung ini atau alat transportasi lain, yang disebut Culturette. Mereka juga boleh disediakan di makmal.

Asas

Tujuan mod pengangkutan Stuart adalah untuk memastikan sampel hampir sama dengan keadaan asalnya sehingga diproses.

Natrium gliserofosfat dan kalsium klorida adalah sistem penyangga yang berfungsi dengan mengekalkan pH dan osmolariti.

Sementara itu, sodium thioglycollate bertindak sebagai agen pengurangan dan sekiranya mengandungi agar, ia memberikan konsistensi separa pepejal, untuk melambatkan pengoksigenan medium. Akhirnya, metilena biru adalah penunjuk pengoksidaan, iaitu, ia mengesan kehadiran oksigen.

Medium separa pepejal dengan penunjuk redoks sangat sesuai untuk mengangkut sampel di mana kehadiran bakteria anaerobik disyaki.

Ciri-ciri alat pengangkutan

Medium Stuart, seperti semua alat pengangkutan, memenuhi ciri-ciri tertentu, termasuk:

-Mengekalkan strain mikrob yang berdaya maju tanpa membiak.

-Tidak mengandungi nutrien; Sebatiannya bertujuan menjaga sampel terhidrat, dalam keadaan pH dan osmolariti yang mencukupi.

-Menghambat autolisis beberapa mikroorganisma halus, seperti Pneumococcus.

-Penggunaannya bersifat sementara, tidak boleh berpanjangan terlalu lama.

Penyediaan

Medium Stuart separa pepejal dengan penunjuk redoks

Persiapan rumah

Bahan-bahan

Natrium gliserofosfat 10 gr

Natrium thioglycollate 1.0 gr

Kalsium klorida 0.1 gr

Biru metilena 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Air suling 1 L

Campurkan komponen dan panaskan hingga larut sepenuhnya. Tuangkan ke dalam tiub atau swab khas. Mereka dimasukkan ke dalam autoklaf dan disterilkan pada suhu 121ºC selama 15 minit. Biarkan tiub sejuk dalam kedudukan menegak (dalam bentuk blok). Simpan pada suhu bilik.

Penyediaan dengan medium komersial

Timbang 14.1 g medium dalam 1 liter air suling. Panas bergoncang hingga larut sepenuhnya, ia boleh direbus. Selebihnya prosedur seperti yang telah dijelaskan.

Medium dehidrasi berwarna krim dan disediakan mestilah berwarna biru di permukaannya. Ini disebabkan oleh adanya metilena biru.

PH medium mesti disesuaikan dengan 7.4 ± 0.2

Liquid Modified Stuart Medium (buatan sendiri)

Bahan-bahan

Natrium gliserofosfat 10 gr

Natrium thioglycollate 1 gr

Kalsium klorida dihidrat 0.1 gr

Air suling 1000 ml

Ia mempunyai bahan yang sama dengan separa pepejal, tetapi tidak mempunyai agar, atau metilena biru. Dalam kes ini, komponen dicampurkan tanpa pemanasan dan 0.5 ml diedarkan dalam tiub 16 x 125 mm dengan penutup skru.

Ia disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 ° C selama 10 minit. Untuk pengambilan sampel, swab dacron harus digunakan jika sampelnya untuk PCR atau rayon jika untuk kultur.

Tiub disimpan pada suhu bilik.

Permohonan

Secara komersial terdapat alat pengangkutan sampel khas yang disebut Culturette; Peranti ini adalah tiub nipis memanjang yang mempunyai swab di dalam dan di hujungnya terdapat segmen yang mengandungi medium Stuart separa pepejal atau cair.

Peranti dibuka dan sampel diambil dengan swab. Ia kemudian dimasukkan kembali ke dalam tiub sehingga hujung swab dimasukkan ke dalam medium pengangkutan separa pepejal; Sebahagiannya membawa span poliuretana yang diresapi dengan medium Stuart cair, dengan sampel tersebut akan dipelihara ketika disimpan dalam keadaan basah.

Sekiranya terdapat kehadiran mikroorganisma halus, pelapik kapas dengan arang harus digunakan untuk mengumpulkan sampel.

Sampel yang boleh diambil dengan swab atau swab dan dipindahkan dalam media ini adalah exudate faring, swab rektum, dan pelbagai rembesan, termasuk: vagina, uretra, luka, okular, telinga, dan abses.

Semasa pemindahan sampel dalam medium pengangkutan ke makmal, keadaan persekitaran yang melampau hingga terlalu panas (terlalu sejuk atau terlalu panas) mesti dielakkan. Perubahan mendadak dalam tekanan atmosfera juga harus dielakkan.

Masa di mana media mampu menjaga mikroorganisma berdaya maju akan bergantung pada ketegangan yang dimaksudkan. Sebagai contoh, untuk mikroorganisma genus Neisserias dan Haemophilus, mereka boleh bertahan sehingga 24 jam, tetapi strain seperti Salmonella atau Shigella dapat bertahan selama berhari-hari dan bahkan berminggu-minggu.

Sekiranya dianggarkan bahawa pemprosesan sampel mungkin mengambil masa lebih dari 4 hari, lebih baik membekukan sampel pada suhu -70 ° C.

Pengenalpastian sampel dalam kaedah pengangkutan

Alat pengangkutan atau budaya komersial yang disediakan mesti mempunyai label di mana maklumat berikut akan ditempatkan:

Nama depan dan belakang pesakit: mengelakkan kekeliruan sampel.

Nombor pengenalan: lebih senang membuat pesanan di tempat kerja.

Sumber pengumpulan sampel: membantu ahli bakteriologi memilih media kultur yang sesuai.

Menghadiri doktor: Kadang kala perlu dilakukan perundingan.

Tarikh dan masa pengumpulan sampel: perlu untuk penerimaan atau penolakan sampel mengikut masa yang berlalu antara pengumpulan sampel dan penerimaan di makmal.

Maklumat lain yang sangat berguna untuk dilampirkan adalah:

Diagnosis dugaan: memandu penambahan media kultur khas mengikut diagnosis yang disyaki.

Rawatan antibiotik: berguna untuk dilampirkan dalam antibiogram.

Semua maklumat ini sangat penting untuk memastikan pemprosesan sampel yang betul.

QA

Untuk menilai prestasi medium Stuart, strain yang diketahui dapat diinokulasi dan disimpan pada suhu 25 ° C, seperti: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

Dalam semua kes, diharapkan mikroorganisma dapat dipulihkan, disimpan selama 24 jam.

Sebaliknya, strain lain boleh digunakan seperti: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dan Escherichia coli ATCC 11775.

Dalam semua kes, pemulihan yang banyak dijangka sehingga 96 jam.

Batasan

Beberapa kajian memastikan bahawa gliserofosfat yang terdapat dalam medium Stuart dapat dimetabolisme oleh beberapa koliform, antara bakteria Gram negatif yang lain, dan oleh itu membiak dalam medium ini.

Risiko ini meningkat apabila proses sampel ditangguhkan. Begitu juga, pendedahan suhu sederhana hingga tinggi Stuart semasa pengangkutan mempengaruhi ini.

Rujukan

1. "Medium pengangkutan (mikrobiologi)." Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 13 Apr 2018, 10:36 UTC. 1 Apr 2019. Terdapat di: es.wikipedia.org
2. Makmal Microkit: Media Budaya. Pengangkutan Stuart. Terdapat di: Terdapat di: Medioscultivo.com
3. Makmal. Alat pengangkutan Stuart. Terdapat di: lablinsan.cl
4. MDM saintifik. Kelebihan mempunyai medium pengangkutan mikrobiologi Stuart. Terdapat di: mdmcientifica.com
5. Makmal Metrix. Stuart. 2017. Terdapat di: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologi. Edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.