MERAH CONGO: CIRI, PENYEDIAAN DAN APLIKASI - BIOLOGI - 2025

The Congo red adalah pewarna azo untuk protein yang terbentuk dengan menggabungkan garam diazonium dan cincin aromatik aktif. Bahan ini mampu menyerap sinaran elektromagnetik dalam spektrum yang dapat dilihat, sebab itulah ia mempunyai warna yang kuat.

Ia dikenakan secara negatif. Oleh itu, ia mempunyai kaitan dengan komponen sel yang bermuatan positif, seperti bahan protein tertentu. Warnanya berbeza mengikut pH. Dalam pengertian ini, jika mediumnya berasid (<daripada pH3), warnanya biru pekat. Antara pH3 - pH 5.2 itu adalah fuchsia (zon putar), dan dengan> pH 5.2 warnanya merah tua.

Larutan koloid Dehidrat Merah dan Congo Merah. Sumber: Pixinio.com dan Wikipedia.com

Ini adalah bahan yang sangat serba boleh, kerana mempunyai banyak kegunaan. Ini telah digunakan sebagai pewarna dalam industri tekstil, dan juga untuk sel dan kain.

Juga untuk membuat media kultur yang mengukur tindakan enzimatik, sebagai penunjuk pH, sebagai bahan kontrol dalam penilaian fungsi spektrofotometer yang tepat, dalam studi pembentukan biofilm, atau dalam diagnosis amiloid.

Begitu juga, ia memungkinkan untuk membezakan serotaip bakteria dan kulat dengan mengenal pasti struktur tertentu di dindingnya (lipopolysaccharides).

Ciri-ciri merah Congo

Bahan ini ditemui oleh Böttiger pada tahun 1884. Ini adalah turunan diazonium yang dibentuk oleh asid bis-diazoat benzidin dengan asid naphthionic. Molekul merah Congo berukuran 21 Armstrong dan berat molekul kira-kira 8000 g / mol.

Merah kongo dicirikan oleh larut dalam air, dan lebih-lebih lagi dalam pelarut organik seperti etanol, membentuk larutan koloid.

Ini mempunyai pertalian untuk selulosa, untuk tisu amiloid, dan untuk komponen sel bermuatan positif.

Penyediaan

Congo Red disediakan dalam kepekatan yang berbeza bergantung pada teknik yang akan digunakan. Sebilangan besar menggunakan Congo red pada 1%, 2%, 0.1%, antara lain.

Sebagai contoh, untuk menyiapkan 2% merah Congo, 2 g pewarna makanan yang kering akan ditimbang dan ditambahkan 100 ml air suling. Ia kemudian disimpan dalam botol ambar.

Permohonan

Sebagai pewarna dalam industri tekstil

Sejak dulu ia digunakan secara meluas dalam industri tekstil karena pemasangannya pada kapas, tetapi saat ini tidak digunakan lagi kerana karsinogenik dan juga kerana warnanya tidak stabil, berubah warna dengan menggosok.

Penentuan kapasiti pembentukan biofilm

Kapasiti pembentukan biofilm mikroorganisma telah terbukti menjadi faktor virulensi.

Dalam pengertian ini, pewarna merah Congo digunakan sebagai kaedah untuk menentukan pembentukan biofilm. Merah Congo mengikat eksopolysakarida yang terdapat dalam biofilm. Walau bagaimanapun, berbanding dengan kaedah lain, ini adalah yang paling tidak disarankan kerana terdapat negatif palsu yang tinggi.

Kaedahnya menggunakan agar merah Congo, ini terdiri daripada agar darah sebagai asas, glukosa (10 g / l) dan pewarna merah Congo (0,4 g / l). Strain yang akan dinilai disemai dalam medium dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 ° C, dan kemudian diinkubasi selama 48 jam pada suhu bilik.

Ujian positif dibuktikan sekiranya koloni kristal berwarna hitam dan penampilan kering diperhatikan.

Kawalan kualiti spektrofotometer

Untuk menilai sama ada alat penyerap atau pengukuran transaksi mematuhi parameter fotometrik yang ditetapkan oleh peraturan antarabangsa, teknik sederhana dapat digunakan untuk menentukan apakah peralatan memancarkan hasil dalam rentang penerimaan.

Salah satu teknik penilaian adalah menggunakan Congo red, berdasarkan titik isosbestic.

Titik isosbestic adalah panjang gelombang di mana merah Congo memancarkan serapan yang sama secara bebas dari pH, kepekatan dan suhu. Nilai serapan tetap dan boleh dijadikan rujukan.

Titik isosbestik teoritis merah Congo diketahui 541 nm. Sekiranya nilai yang diperoleh berbeza, diketahui bahawa peralatan tersebut mempunyai masalah drift panjang gelombang, dan perlu diperiksa oleh juruteknik khusus.

Penyediaan media budaya

Ortiz et al. Huraikan medium kultur yang disiapkan dengan pewarna merah Congo dan karboksimetilselulosa yang disebut agar CMC, untuk mengesan ketegangan mikrob selulit; iaitu, pengeluar selulase (endogluconeses, exoglucanases dan ß-glucosidase).

Medium ini mempunyai pewarnaan yang kuat. Warnanya akan hilang dengan tindakan enzim endoglucanase yang memecah struktur karboksimetilselulosa. Ini menunjukkan reaksi positif.

Penurunan kelikatan dan penyerapan membolehkan aktiviti enzim diukur. Contohnya, pada strain Streptomyces sp.

Pengenalpastian mikroorganisma

Congo red mempunyai pertalian untuk struktur polisakarida strain tertentu, sehingga mencapai pengenalpastian mikroorganisma ini. Antaranya ialah Escherichia coli, dan Shigella flexneri.

Plat agar merah Congo juga digunakan untuk memperoleh koloni khas, seperti halnya Azospirillum sp, yang memberikan koloni merah-merah, antara lain.

Pewarnaan sel dan tisu

Salah satu aplikasi Congo red yang paling biasa adalah kegunaannya dalam diagnosis amiloidosis. Penyakit pelik ini terdiri daripada pengumpulan protein yang tidak normal dalam pelbagai organ. Protein tidak normal ini dibuat di sumsum tulang dan dipanggil amiloid.

Congo red mempunyai pertalian yang tinggi untuk bahan ini. Properti ini telah digunakan untuk menunjukkan kehadirannya di bahagian tisu histologi. Congo Red digunakan bersamaan dengan Hematoxylin / Eosin untuk tujuan ini.

Penyatuan tisu amiloid dan merah Congo berlaku melalui ikatan hidrogen bukan polar, antara kumpulan karboksil dan kumpulan amino. Protein amiloid memberikan kumpulan karboksil (COOH) dan Congo merah kepada kumpulan amino.

Tisu amiloid diwarnai dalam pelbagai rona mulai dari merah jambu hingga merah pekat ketika dilihat di bawah mikroskop cahaya. Dalam mikroskop dengan cahaya terpolarisasi berganda, persiapan ini diperhatikan dengan birefringence hijau apel patognomonik.

Maksudnya, mereka menyajikan dikroisme, kerana serat ameloid adalah anisotropik. Pemerhatian ini mengesahkan diagnosis.

Pewarnaan tisu dengan warna merah Congo sesuai dengan metodologi diagnostik lain, seperti kaedah imunoktokimia, dan bahkan boleh diwarnakan semula.

Sebagai penunjuk pH

Sifat membalikkan perubahan pH digunakan dengan teknik yang disebut kromoendoskopi.

Teknik ini menggunakan pewarna dan penunjuk pH yang memungkinkan pengesanan patologi tertentu. Di antaranya adalah penggunaan Congo red, yang dapat mendedahkan fokus barah awal pada mukosa gastrik, yang digunakan sebagai penanda keasidan.

Teknik ini berdasarkan fakta bahawa Congo merah pada pH asid berwarna hitam. Oleh itu, setelah meletakkan larutan merah Congo pada mukosa gastrik, kawasan di mana terdapat kelembutan akan dipilih untuk mengambil sampel untuk biopsi, iaitu di mana tidak ada penghasilan asid. Ini menunjukkan adanya fokus barah atau kehilangan sel parietal.

Rujukan

1. "Congo Red." Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 8 Mei 2019, 12:13 UTC. 16 Mei 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Kaedah baru untuk pengukuran aktiviti endoglucanase berdasarkan kompleks merah selulosa-Kongo. Orinoquia. 2011 Jun; 15 (1): 7-15. Boleh didapati dari: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Penghasilan biofilm dalam genotip Staphylococcus aureus yang diasingkan dari mastitis lembu di Cuba. Rev Salud Anim. . 2013 Dis; 35 (3): 189-196. Terdapat di: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Manifestasi kulit amiloidosis sistemik sebagai kunci diagnostik: Kes klinikal. Pendeta perubatan Cili. 2012 Apr; 140 (4): 499-502. Terdapat dalam: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotometer dan Photocolorimeters Panduan kemas kini praktikal. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (September-Disember): Terdapat di: redalyc.org
6. Marin J, Díaz J dan Solís J. Chromoendoscopy dalam jangkitan Helicobacter pylori: adakah masa reaksi? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Kimia organik. Reverté Pengarang. Barcelona, ​​Sepanyol. Terdapat di: books.google.co.ve
8. Teknik pewarnaan tisu Murillo M. Universiti Guadalajara, Mexico. Boleh didapati di: akademia.edu
9. Paillié M. Penentuan aktiviti selulolitik, ligninolitik dan amilolitik Actinobacteria yang diasingkan dari tanah rizosfera semanggi putih (Trifolium repens). 2012. Pontificia Universidad Javeriana Fakulti Sains Mikrobiologi Industri Bogotá DC Terdapat di: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Pengasingan dan pengenalan Azospirillum sp. di rumput Guinea (Panicum maksimum Jacq.) dari Lembah Cesar. Padang Rumput dan Makanan, 2010; 33 (3): 1-8 Terdapat dalam: scielo.