BAIRD PARKER AGAR: ASAS, PENYEDIAAN DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2026

The agar Baird Parker ialah terpilih medium pepejal dan budaya yang berbeza. Ia dibuat pada tahun 1962 untuk pengesanan dan pengiraan staphylococci positif koagulase (Staphylococcus aureus).

Ia terdiri daripada hidrolisis pankreas kasein, ekstrak daging, ekstrak ragi, litium klorida, glisin, natrium piruvat, kalium Tellurite, agar dan emulsi kuning telur.

Koloni Staphylococcus aureus khas pada agar Baird Parker. Sumber: Daizy John

Baird Parker Agar berdasarkan kemampuan S. aureus untuk mengurangkan Tellurite dan menghasilkan lecithinase. Kedua-dua sifat menghasilkan jajahan dengan ciri khas untuk spesies ini. Oleh itu, sangat berkesan dalam mengesan mikroorganisma ini.

Koloni khas S. aureus berwarna hitam atau kelabu gelap, dengan sempadan tanpa warna dan lingkaran cahaya yang mengelilingi mereka, membezakannya dari mikroorganisma lain. Patogen ini boleh didapati dalam sampel klinikal, perairan, kosmetik, dan makanan mentah atau dimasak.

Diagnosis atau pengesanannya sangat penting, kerana pelbagai patologi yang dihasilkannya, seperti keracunan makanan, sindrom kulit yang melecur, sindrom kejutan toksik, abses, meningitis, septikemia, endokarditis, antara lain.

Asas

Kekuatan berkhasiat

Hidrolisis pankreas kasein, ekstrak daging dan ekstrak ragi adalah sumber nutrien, vitamin dan mineral yang diperlukan untuk pengembangan mikroba umum, sementara piruvat dan glisin adalah sebatian yang menyokong pertumbuhan spesifik Staphylococcus aureus.

Selektif

Baird Parker Agar bersifat selektif kerana mengandungi zat-zat yang menghambat pertumbuhan flora yang menyertainya, sambil mempromosikan pengembangan S. aureus. Sebatian perencatnya adalah litium klorida dan kalium Tellurite.

Pembezaan

Medium ini memungkinkan untuk membezakan S. aureus dari Staphylococci negatif koagulase yang lain. S. aureus mempunyai keupayaan untuk mengurangkan Tellurite untuk membebaskan Tellurium hitam logam, membentuk koloni hitam atau kelabu gelap.

Begitu juga, kuning telur memberikan substrat untuk menunjukkan kehadiran enzim lesitinase dan lipase. S. aureus positif lecithinase dan oleh itu lingkaran cahaya akan diperhatikan di sekitar koloni, yang menunjukkan bahawa lesitin dihidrolisis.

Dalam pengertian ini, penampilan pada agar-agar koloni hitam atau kelabu gelap berkilat ini dengan lingkaran cahaya di sekelilingnya menunjukkan kehadiran S. aureus.

Sekiranya zon pemendakan terbentuk, ini menunjukkan aktiviti lipase. Beberapa strain S. aureus adalah lipase positif dan yang lain negatif.

Sekiranya S. aureus positif lipase, kawasan legap akan diperhatikan di sekitar koloni kelabu hitam atau gelap, dan kemudian lingkaran cahaya disebabkan oleh tindakan lesitinase.

Koloni bakteria selain S. aureus yang mampu tumbuh pada medium ini akan mengembangkan koloni berwarna atau coklat tanpa lingkaran halo di sekitarnya.

Koloni hitam yang tidak biasa juga dapat dilihat dengan atau tanpa sempadan yang tidak berwarna, tetapi tanpa lingkaran cahaya. Jajahan ini tidak boleh diambil kira, mereka tidak sesuai dengan S. aureus.

Penyediaan

Emulsi kuning telur

Ambil telur ayam segar, basuh dengan baik dan letakkan dalam alkohol 70% selama 2 hingga 3 jam. Telur kemudian dibuka secara aseptik dan putihnya dipisahkan dengan teliti dari kuning telur. Selepas itu, 50 ml kuning telur diambil dan dicampurkan dengan 50 ml larutan fisiologi steril.

Tellurite kalium 1% w / v

Beberapa rumah komersil menjual 1% kalium Tellurite yang siap digunakan. Ia ditambahkan ke medium sebelum medium mengeras.

Untuk menyediakan larutan ini di makmal, 1,0 g Tellurite kalium ditimbang dan dilarutkan dalam satu bahagian air. Selepas itu, jumlah air selesai hingga mencapai 100 ml. Larutan mesti disterilkan dengan kaedah penapisan.

Penyediaan medium budaya

Timbang 60 g medium dehidrasi dan larutkan dalam 940 ml air suling. Biarkan campuran selama kira-kira 5-10 minit.

Sapukan haba dengan mengacau media secara kerap untuk memperbaiki proses pembubaran. Didihkan selama satu minit. Sterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 ° C selama 15 minit.

Diamkan hingga mencapai suhu 45 ° C dan tambahkan 50 ml emulsi kuning telur dan 10 ml Tellurite 1%. Gaul rata dan tuangkan 15-20 ml ke dalam piring Petri yang steril.

Biarkan pekat, pesan dalam plak terbalik dan simpan di dalam peti sejuk sehingga digunakan.

PH akhir medium yang disediakan mestilah 6.8 ± 0.2.

Sebelum menyemai sampel, tunggu pinggan mencapai suhu bilik. Benih pinggan dengan meregangkan atau dengan penyemaian permukaan dengan spatula Drigalski.

Warna medium yang dikeringkan adalah warna coklat muda dan warna medium yang disediakan berwarna kuning muda.

Gunakan

Sampel klinikal

Sampel klinikal ditaburkan secara langsung, membuang sebahagian bahan di salah satu hujung pinggan, dan dari situ ia diletupkan oleh keletihan. Inkubkan selama 24 hingga 48 jam pada suhu 35-37 ° C.

Contoh makanan

Timbang 10 gr sampel makanan dan homogenkan dalam 90 ml 0,1% air peptone, dari situ pengenceran disediakan jika perlu. Suntikan piring dalam rangkap tiga dengan 0.3 ml larutan yang telah disediakan, dan benih di permukaan dengan spatula Drigalski. Inkubkan selama 24 hingga 48 jam pada suhu 35-37 ° C.

Metodologi ini memungkinkan untuk menghitung koloni khas yang diperoleh dan sangat sesuai apabila kehadiran S. aureus disyaki melebihi 10 CFU per g / ml sampel.

Sekiranya jumlah S. aureus disyaki kecil atau terdapat banyak flora yang menyertainya, disarankan untuk memperkaya sampel dalam kaldu soya triptik dengan 10% NaCl dan 1% natrium piruvat. Ini akan mendorong pertumbuhan S. aureus dan menghalang perkembangan flora yang menyertainya. Tiub keruh disemai pada agar Baird Parker.

Contoh air

Dalam sistem penyaringan vakum disterilkan 100 ml air kajian ditapis, dan kemudian membran mikropori 0,4 mikron dikeluarkan dengan forceps steril dan diletakkan di atas piring Baird Parker. Inkubkan selama 24 hingga 48 jam pada suhu 35-37 ° C. Teknik ini memungkinkan untuk mengira koloni S. aureus khas.

QA

Strain yang dikenali seperti Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 atau Proteus mirabilis ATCC 43071 dapat digunakan untuk menilai kualiti agar Baird Parker.

Dalam kes strain S. aureus ATCC, diketahui mengurangkan Tellurite, dan mereka positif lipase dan lesitinase. Oleh itu, mesti ada pembangunan yang memuaskan dan tumbuh koloni cembung dengan pusat hitam dan sempadan tidak berwarna, dengan lingkaran cahaya legap dan lingkaran cahaya paling terang.

Sebaliknya, S. epidermidis dijangka berkembang dengan buruk pada medium ini, dengan koloni kelabu kecoklatan hingga hitam, tanpa lingkaran cahaya.

Bagi E. coli dan P. mirabilis diharapkan dapat dihambat secara keseluruhan atau sebahagian. Sekiranya tumbuh, koloni coklat akan berkembang tanpa kawasan legap atau lingkaran cahaya.

cadangan

-Media tidak boleh dipanaskan setelah menambah telur dan kuning telur.

-Penyediaan emulsi kuning telur dan penambahannya di tengah adalah langkah yang sangat mudah terkena pencemaran. Penjagaan yang melampau mesti diambil.

-Jika terdapat kehadiran koloni khas S. aureus, ia harus disahkan dengan memasang ujian koagulase pada strain tersebut.

-Jika ada hasil yang diragukan dengan koagulase, ujian pengesahan lain harus dipasang.

-Hati-hati agar tidak mengelirukan kehadiran koloni S. aureus khas dengan koloni hitam yang tidak biasa.

Rujukan

1. Penyumbang Wikipedia. Agar Baird-Parker. Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 15 Mac 2017, 19:36 UTC. Terdapat di: wikipedia.org/ Diakses pada 18 Februari 2019.
2. Makmal BD. Baird Parker Agar. 2006. Terdapat di: bd.com
3. Makmal Britannia. Pangkalan agar Baird Parker. 2015. Terdapat di: britanialab.com
4. Makmal Francisco Soria Melguizo. 2009. Baird Parker Agar. Terdapat di: http://f-soria.es/Inform
5. Makmal Britannia. Tellurite kalium. 2015. Terdapat di: britanialab.com
6. Alarcón-Lavín M, Oyarzo C, Escudero C, Cerda-Leal F, Valenzuela F. Pembawa enterotoksigenik Staphylococcus aureus jenis A, dalam smear nasofaring pada pengendali makanan. Rev Med Chile 2017; 145: 1559-1564
7. Venezuela Standard Covenin 1292-89. (1989). Makanan. Pengasingan dan penghitungan Staphylococcus aureus. Terdapat di: sencamer.gob.ve