AGAR-AGAR MACCONKEY: RASIONAL, PENYEDIAAN, DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2026

The MacConkey agar ialah medium pepejal yang membolehkan pengasingan eksklusif bakteria negatif Gram. Atas sebab ini, ini adalah media selektif dan juga memungkinkan membezakan antara fermentasi laktosa dan bacilli bukan fermentasi, yang menjadikannya medium pembezaan. Ini adalah salah satu media budaya yang paling banyak digunakan di makmal mikrobiologi.

Medium ini digunakan terutamanya untuk pengasingan basil negatif Gram yang tergolong dalam keluarga Enterobacteriaceae, termasuk spesies oportunistik dan enteropatogenik.

Agar-agar MacConkey disemai dengan dua jenis bakteria. Koloni penapaian laktosa sebelah kiri, koloni penapaian bukan laktosa sebelah kanan.

Ia juga dapat digunakan untuk mengasingkan basil enterik lain yang hidup di saluran gastrointestinal, tetapi tidak termasuk dalam Enterobacteriaceae, seperti Aeromonas sp, Plesiomonas sp, antara lain.

Akhirnya, ia dapat mengasingkan bacilli Gram-negatif fermentasi bukan glukosa lain yang terdapat di persekitaran, air atau tanah, tetapi kadang-kadang boleh menjadi patogen oportunis seperti Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, antara lain.

Asas

Agar-agar MacConkey

Asas media ini dapat dijelaskan melalui perihalan komponennya, kerana masing-masing mempunyai tujuan yang menentukan sifatnya.

Garam hempedu dan ungu kristal

Dalam pengertian ini, agar MacConkey mempunyai komposisi yang kompleks. Pertama sekali ia mengandungi garam hempedu dan kristal ungu.

Unsur-unsur ini bertanggungjawab untuk menghambat pertumbuhan bakteria Gram positif dan beberapa bacilli Gram negatif. Pada gilirannya, ia mendorong pengembangan bacilli Gram negatif yang tidak dipengaruhi oleh bahan-bahan ini. Oleh itu ia adalah media terpilih.

Ia dikatakan sedikit selektif berbanding media lain yang juga menghalang pertumbuhan bakteria Gram positif dan juga bakteria Gram negatif.

Peptone, polypectones dan laktosa

Ia mengandungi zat yang memberikan nutrien yang diperlukan kepada mikroorganisma yang berkembang di persekitaran ini, seperti peptone, polypectones dan lactose.

Laktosa adalah titik utama bagi medium untuk menjadi medium pembezaan, kerana mikroorganisma yang mempunyai kemampuan untuk menapai laktosa akan mengembangkan koloni merah jambu yang kuat.

Sebilangan bakteria dapat menapai laktosa secara perlahan atau lemah, mengembangkan koloni merah jambu pucat dan tetap positif laktosa.

Mereka yang tidak fermentasi laktosa menggunakan peptone sebagai sumber tenaga, menghasilkan ammonia, mengalkali medium. Atas sebab ini, koloni yang berasal tidak berwarna atau telus.

Petunjuk PH

Perubahan warna dicapai melalui sebatian penting lain yang dimiliki agar agar MacConkey. Sebatian ini adalah penunjuk pH, yang dalam hal ini berwarna merah neutral.

Penapaian laktosa menghasilkan pengeluaran asid campuran. Mereka mengasidkan medium hingga pH di bawah 6.8.

Ini menyebabkan penunjuk pH berpusing ke arah warna merah jambu yang dalam. Keamatan warna mungkin berbeza bergantung pada pH akhir.

Air suling, natrium klorida, dan agar

Sebaliknya, ia mengandungi air suling dan natrium klorida yang memberikan penghidratan medium dan keseimbangan osmotik. Akhirnya, media mengandungi agar, yang merupakan asas yang memberikan konsistensi medium pepejal.

Medium agar MacConkey yang disediakan hendaklah mempunyai pH akhir yang disesuaikan dengan 7.1 ± 0.2.

Penyediaan

Untuk satu liter agar-agar MacConkey, 50 g medium dehidrasi mesti ditimbang, kemudian dimasukkan ke dalam termos dan dilarutkan dalam satu liter air suling. Setelah 10 minit berdiri, ia dipanaskan, kacau terus hingga mendidih selama 1 minit.

Kelalang kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf dan disterilkan pada suhu 121 ° C selama 20 minit. Pada penghujung waktu, ia dikeluarkan dari autoklaf dan dibiarkan sejuk sehingga mencapai suhu 45 ° C, kemudian disajikan dalam piring Petri yang steril di dalam tudung aliran lamina atau di hadapan pembakar Bunsen.

Biarkan padat dan simpan di dalam pemegang piring terbalik dan sejukkan di dalam peti sejuk pada suhu 2-8 ° C sehingga digunakan.

Untuk mendapatkan agar-agar MacConkey yang menghalang kesan pembengkakan yang dihasilkan oleh gen Proteus, digunakan agar-agar MacConkey yang rendah garam.

Penggunaan agar-agar MacConkey konvensional

MacConkey Agar termasuk dalam semua set media kultur yang disusun untuk menyemai sampel klinikal yang diterima di makmal. Ia juga berguna dalam mikrobiologi makanan dan mikrobiologi persekitaran.

Kepelbagaian batang negatif Gram yang tumbuh di media ini menyatakan ciri fenotipik yang membantu membuat diagnosis andaian spesies yang dimaksudkan. Contohnya ukuran, warna, konsistensi dan bau koloni, adalah beberapa ciri yang dapat memberi petunjuk.

Dalam medium ini, spesies Escherichia coli, Klebsiella sp dan Enterobacter sp menghasilkan koloni merah jambu yang kuat, dikelilingi oleh zon hempedu yang diendapkan.

Manakala, bakteria seperti Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp dan Hafnia sp dapat muncul tidak berwarna setelah 24 jam atau merah jambu pucat dalam 24 -48 jam.

Begitu juga, genera Proteus, Edwadsiella, Salmonella dan Shigella menghasilkan koloni yang tidak berwarna atau telus.

Varian lain dari agar MacConkey

Terdapat varian lain dari MacConkey Agar yang mempunyai tujuan tertentu. Mereka disebutkan di bawah:

Agar MacConkey dengan sorbitol

Medium ini dirancang untuk membezakan strain enteropathogenic (enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7) dari strain Escherichia coli yang lain.

Medium ini menukar laktosa karbohidrat dengan sorbitol. Strain E. coli enterohemorrhagic O157: H7 berbeza dari yang lain kerana mereka tidak fermentasi sorbitol dan oleh itu koloni telus diperoleh, sedangkan selebihnya E. coli strain fermentasi sorbitol dan koloni berwarna merah jambu yang kuat.

AgarConkey agar tanpa kristal ungu, atau garam

Agar ini sangat berbeza dengan agar-agar MacConkey klasik, kerana ia tidak mempunyai kristal ungu dan bakteria Gram positif dapat tumbuh.

Sebaliknya, ketiadaan garam menghalang penampilan kawanan pada agar yang dihasilkan oleh beberapa basil enterik, seperti genus Proteus, dan dengan demikian memudahkan pengasingan semua bakteria yang ada, termasuk bakteria Gram positif.

Agar MacConkey dengan cefoperazone

Varian agar MacConkey ini pada mulanya dirancang untuk mengasingkan Laribacter hongkongensis dan kemudian didapati berguna untuk pengasingan Arcobacter butzleri. Kedua-duanya batang Gram negatif yang sedikit melengkung tahan terhadap cefoperazone.

Bakteria ini baru-baru ini dikaitkan untuk menyebabkan gastroenteritis dan mendapat cirit-birit pada individu Asia dan Eropah, muncul sebagai dua patogen yang kuat.

Antibiotik memungkinkan untuk menghambat flora saluran gastrointestinal yang menyertainya, yang menyokong perkembangan bakteria ini, mencegahnya tidak disedari, kerana memerlukan 72 jam untuk tumbuh.

Agar MacConkey disediakan dengan air laut pada kadar 10% v / v

Varian ini berguna untuk penilaian petunjuk kebersihan bakteria pencemaran tinja, termasuk koliform total dan koliform tinja di perairan asin rekreasi (pantai dan teluk).

Cortez et al pada tahun 2013 menunjukkan bahawa media yang disediakan dengan cara ini secara signifikan meningkatkan pemulihan mikroorganisma ini di persekitaran garam, berbanding dengan penggunaan agar-agar MacConkey yang disiapkan dengan air suling.

Ini disebabkan oleh fakta bahawa medium yang diubahsuai merangsang pertumbuhan bakteria yang secara fisiologis dalam keadaan latensi "berdaya maju tetapi tidak dapat dikultur", oleh itu ia tidak dapat dipulihkan dalam media konvensional.

Rujukan

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Penggunaan agar-agar cefoperazone MacConkey untuk pengasingan selektif Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. Agar-agar MacConkey. Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 4 Apr 2018, 18:16 UTC. 29 Dis 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Pengarang Panamericana SA
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologi. (Edisi ke-5.) Argentina, Editor Panamericana SA
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Kesan media budaya yang disediakan dengan air laut pada petunjuk kesihatan di perairan spa di Chichiriviche, negara Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinikal praktikal. University of Cadiz, edisi ke-2. Perkhidmatan Penerbitan UCA.