AGAR PEMAKANAN: RASIONAL, PENYEDIAAN DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2026

The agar nutrien adalah medium tidak terpilih dan tidak ada budaya yang kukuh berbeza. Semua jenis bakteria yang tidak menuntut dari sudut pemakanan tumbuh di medium ini.

Ini adalah medium sederhana dan, walaupun namanya, ia mengandungi nilai pemakanan yang lebih rendah berbanding dengan media lain yang serupa, seperti Brain Heart Infusion Agar atau Trypticase Soy Agar.

Pengiraan koloni pada agar nutrien

Kegunaannya di makmal sangat berbeza-beza. Ia terutama digunakan untuk subkultur spesies, mempertahankan strain, menghitung koloni, sebagai asas untuk menyiapkan agar darah, antara lain.

Begitu juga, kerana warnanya kuning muda, pengeluaran pigmen yang dihasilkan oleh beberapa jenis bakteria dapat dibezakan, seperti pigmen kehijauan Pseudomonas aeruginosa, pigmen merah bata yang dihasilkan oleh Serratia marcescens pada suhu bilik, pigmen kuning keemasan dari Staphylococcus aureus, antara lain.

Di samping itu, ia adalah salah satu media paling murah yang terdapat di pasaran.

Asas

Seperti yang telah disebutkan di atas, ini adalah media yang sangat sederhana yang bergantung pada penyediaan nutrien untuk pertumbuhan bakteria tanpa sekatan dan tanpa reaksi kompleks untuk ditafsirkan.

Oleh kerana medium tembus, sangat sesuai untuk menghitung koloni dengan kaedah penyemaian mendalam.

Komposisi

Ia terdiri terutamanya dari ekstrak daging atau ekstrak ragi, peptone atau gelatin pankreas, agar-agar, natrium klorida dan air suling.

Ekstrak daging atau ragi dan pepton mewakili sumber penting karbon dan mineral (nitrogen, fosforus dan sulfur), yang akan digunakan oleh bakteria sebagai sumber tenaga dan faktor pertumbuhan.

Demikian juga, agar-agar adalah asas semua media kultur padat, menggantikan gelatin, yang merupakan sebatian asas pertama yang digunakan oleh Robert Koch untuk memberikan konsistensi padat kepada media-nya.

Agar adalah polisakarida yang terdiri daripada galaktosa, galactomannan, agarose, dan agaropectin. Ia menetapkan pada 40 ° C dan mencair hampir 100 ° C.

Sebaliknya, natrium klorida menyediakan medium dengan osmolariti yang diperlukan untuk pengembangan bakteria.

Akhirnya, air berfungsi untuk menghidrat dan melarutkan sebatian lyophilized. Air suling yang disesuaikan dengan pH neutral harus digunakan. Air paip tidak boleh digunakan kerana mengandungi kalsium dan magnesium yang dapat bertindak balas dengan fosfat dalam medium dan membentuk garam yang tidak larut.

Penyediaan

Untuk satu liter agar nutrien, 31 g medium dehidrasi mesti ditimbang. Letakkan di dalam termos dan larutkan dalam satu liter air suling. Setelah 5 minit berdiri, panaskan di atas sumber haba dan kacau terus sehingga mendidih selama 1 atau 2 minit.

Penyediaan medium budaya.

Kelalang kemudian diletakkan dalam autoklaf dan disterilkan pada suhu 121 ° C selama 20 minit.

Pensterilan dalam autoklaf

Pada akhir masa, ia dikeluarkan dari autoklaf dan disajikan dalam piring Petri yang steril, menggunakan tudung aliran lamina atau pembakar Bunsen.

Sekiranya piring Petri boleh guna (plastik), media mesti diedarkan apabila agar mempunyai suhu kira-kira 50 ° C, untuk mengelakkannya cacat akibat panas yang berlebihan.

Biarkan padat dan simpan pada pemegang piring terbalik dan sejukkan pada suhu 2-8 ° C sehingga digunakan.

Plat mesti diperah sebelum ditaburkan. Plat agar nutrien tidak boleh digunakan jika tercemar atau mengalami dehidrasi.

PH medium yang disediakan mesti disesuaikan dengan 7.3 ± 0.2.

Permohonan

Ini adalah medium budaya paling sederhana yang digunakan di makmal mikrobiologi. Rumusannya sangat baik untuk pertumbuhan bakteria yang tidak menuntut.

Kegunaan utamanya dijelaskan di bawah:

Sebagai asas penyediaan agar darah

Medium ini kadang-kadang digunakan sebagai alas untuk menyediakan agar darah, namun ia bukan asas yang paling biasa digunakan.

Merangsang sporulasi bakteria pembentuk spora

Medium kultur ini sangat berguna untuk merangsang sporulasi bakteria pembentuk spora seperti Bacillus sp.

Untuk ini, regangan genus Bacillus disemai dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 ° C dalam aerobiosis. Setelah tanah jajahan tumbuh, piring mengalami tekanan suhu, iaitu suhu oven meningkat hingga 44 ° C dan dibiarkan selama 24 jam lagi atau diletakkan di dalam peti sejuk selama 24 jam.

Pada akhir masa, smear budaya dibuat dan diwarnai dengan noda Gram atau dengan noda spora Shaeffer-Fulton. Di dalamnya, bacilli dengan endospora (spora di dalam bacillus) dan exospores (spora di luar bacillus) akan diperhatikan.

Penyelenggaraan regangan

Sebilangan makmal sokongan penyelidikan atau penyelidikan universiti memerlukan mengekalkan bakteria yang penting dengan kepentingan klinikal selama mungkin, untuk menggunakan bank bakteria (bacterioteca) untuk kerja penyelidikan atau untuk penyediaan amalan pengajaran, di mana Pelajar akan belajar memanipulasi dan mengenal pasti mikroorganisma ini.

Agar nutrien, serta agar infusi jantung otak, dapat digunakan untuk tujuan ini. Agar disiapkan, dituangkan ke dalam tiub dengan penutup bakelit dan dimiringkan di pangkal, sedemikian rupa sehingga agar pepejal menguat membentuk blok di bahagian bawah dan serong di permukaan (seruling seruling).

Setiap tiub dilabelkan dengan nama bakteria yang akan disemai dan tarikhnya. Setiap bakteria akan disemai di bevel dan diinkubasi selama 24 jam.Setelah koloni tumbuh, tiub disimpan pada suhu bilik.

Bakterioteca mesti diperbaharui dari 1 hingga 3 bulan, untuk mengelakkan pencemaran dan dehidrasi medium dan juga kematian bakteria.

Hanya bakteria yang tidak terpilih yang dapat dipelihara dengan cara ini.

Kiraan jajahan

Walaupun ada cara khusus untuk menghitung koloni, seperti agar bilangan standard, agar nutrien dapat digunakan untuk tujuan ini, baik dengan penyemaian permukaan dengan spatula drigalski atau secara mendalam. Atas sebab ini sangat berguna dalam analisis mikrobiologi makanan dan air.

Menjalankan ujian diagnostik

Oleh kerana ia adalah media yang tidak mengandungi darah, atau bahan tambahan lain, sangat sesuai untuk mengambil koloni yang tumbuh di media ini untuk melakukan ujian katalase.

Begitu juga, kerana warnanya yang terang, ditunjukkan untuk melakukan ujian oksidase secara langsung pada kawasan agar-agar yang dibiakkan, tanpa gangguan.

Pemulihan aerob mesofilik dari perairan garam rekreasi (Pantai)

Agar nutrien yang disediakan dengan air laut 10% berguna untuk penilaian aerob mesofilik di perairan pantai.

Dengan cara ini, tahap pencemaran sebenar yang dimiliki perairan dengan mikroorganisma ini dapat dihargai, kerana dalam jenis sampel ini hasilnya bertindih ketika media kultur yang disiapkan dengan cara konvensional digunakan.

Ini ditunjukkan oleh Cortez et al. pada tahun 2013 dalam sebuah karya penyelidikan.

Ini dapat dijelaskan kerana perubahan mendadak yang dialami oleh bakteria ketika pergi dari persekitaran yang terlalu tinggi ke lingkungan yang rendah garam, oleh itu mikroorganisma memasuki keadaan kelesuan di mana ia dapat dilaksanakan, tetapi tidak dapat ditanam.

Rujukan

1. "Agar berkhasiat." Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 13 Sep 2016, 20:33 UTC. 29 Dis 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Pengarang Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologi. (Edisi ke-5.) Argentina, Editor Panamericana SA
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Kesan media budaya yang disediakan dengan air laut pada petunjuk kesihatan di perairan spa di Chichiriviche, negara Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M dan Cardoso M. Mikrobiologi kualiti air untuk dos inseminasi, untuk babi. Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinikal praktikal. University of Cadiz, edisi ke-2. Perkhidmatan Penerbitan UCA.