The agar mannitol garam atau garam manitol ialah terpilih medium pepejal dan budaya yang berbeza. Ia dibuat oleh Chapman untuk pengasingan cocci positif Gram patogen, terutamanya Staphylococcus aureus.
Walau bagaimanapun, juga berguna untuk mengasingkan Staphylococus epidermidis, yang kadang-kadang boleh hadir sebagai patogen oportunis, dan Staphylococcus saprophyticus, patogen kencing yang dikenali, antara spesies lain.
A. Fiola dengan medium agar manitol masin yang telah disediakan. B. Plat agar manitol masin yang disemai dengan strain bakteria manitol fermentasi dan bukan fermentasi. Sumber: A dan B: Foto yang diambil oleh pengarang MSc. Marielsa Gil.
Sebilangan Enterococcus mampu tumbuh pada media ini, serta batang pembentuk spora positif Gram tertentu.
Medium ini sangat berguna dalam analisis sampel klinikal, tetapi ia juga digunakan dalam kajian mikrobiologi makanan dan kawalan kualiti produk industri, seperti kosmetik, ubat-ubatan, antara lain.
Salty Mannitol Agar terdiri daripada ekstrak dan peptone dari daging lembu, triptein, manitol, natrium klorida, fenol merah dan agar.
Asas
Mannitol agar selektif berkat kepekatan garamnya yang tinggi. Saliniti bertindak sebagai bahan penghambat dan menghalang pertumbuhan bakteria Gram negatif.
Ia juga berbeza kerana adanya manitol karbohidrat dan penunjuk pH merah fenol. Dari ini, bakteria yang mampu menapai manitol menghasilkan asid, mengasidkan medium, menjadikan koloni dan medium menjadi kuning.
Sebaliknya, koloni yang tidak memfermentasi manitol tumbuh di medium mengambil nutrien yang disediakan oleh ekstrak dan peptone daging dan triptein. Dari situlah bakteria mengeluarkan karbon, nitrogen, vitamin dan mineral yang diperlukan untuk pertumbuhannya.
Koloni dalam kes ini boleh menjadi merah jambu yang lemah atau kuat, dan mediumnya tetap sama warna atau berubah menjadi fuchsia.
Agar adalah bahan yang memberikan ketekalan kepada medium.
Penyediaan
Untuk menyediakan satu liter agar-agar manitol masin, 111 g medium dehidrasi dari syarikat perdagangan pilihan ditimbang dan dilarutkan dalam 1000 ml air suling, menggunakan labu.
Panas diaplikasikan dengan pengadukan medium yang kerap untuk memperbaiki proses pembubaran. Rebus sebentar.
Kelalang diletakkan di dalam autoklaf pada suhu 121 ° C selama 15 minit.
Pada penghujung waktu, keluarkan botol dari autoklaf, biarkan berehat dan hidangkan antara 15 hingga 20 ml pada piring Petri yang steril ketika suhu sekitar 50 hingga 55 ° C.
Ia dibiarkan padat, memesan dengan cara terbalik dalam plak dan simpan di dalam peti sejuk sehingga digunakan. Sebelum menyemai sampel, tunggu pinggan mencapai suhu bilik.
Plat dibiakkan dengan menggaris atau dengan penyemaian permukaan dengan spatula drigalski. PH akhir medium yang disediakan mestilah 7.4 ± 0.2
Warna medium dehidrasi berwarna kuning muda dan warna medium yang disediakan berwarna merah jingga.
Permohonan
Kerana selektivitinya yang tinggi, medium ini sangat sesuai untuk menyemai sampel dengan flora campuran di mana kehadiran Staphylococus aureus, sebagai patogen utama gen ini, dicari.
Dalam pengertian ini, salah satu kegunaannya yang paling kerap dilakukan adalah dalam analisis mikrobiologi eksudat faring dan sampel pelepasan hidung, terutama untuk mengesan pembawa S. aureus tanpa gejala.
Beberapa negara telah melaksanakan analisis ini sebagai syarat wajib bagi orang yang ingin bekerja sebagai penjual makanan.
Pengendalian ini menghalang penyebaran orang yang menjadi pembawa S. aureus, sehingga mengelakkan keracunan makanan secara besar-besaran, kerana pengambilan makanan yang tercemar dengan enterotoksin staphylococcal.
Ia juga termasuk dalam penyebaran jangkitan luka, kultur darah, CSF, lavage bronchoalveolar, antara lain.
Agar manitol masin berguna untuk mengasingkan semula koloni dari kultur air kencing dari agar CLED atau agar darah yang Gram telah menunjukkan cocci positif Gram dalam kelompok.
Ini juga berlaku dalam analisis mikrobiologi makanan, air minum, tanah, antara aplikasi lain.
QA
Setelah sekumpulan piring dengan agar-agar manitol masin telah disediakan, disarankan untuk melakukan kawalan kualiti. Strain kawalan disemai untuk menunjukkan sama ada terdapat pertumbuhan atau tidak.
Strain Staphylococcus aureus yang dikenali boleh digunakan sebagai kawalan positif. Ia akan tumbuh dengan memuaskan mengembangkan koloni kuning, dan mediumnya juga berubah warna yang sama.
Begitu juga, lebih senang memasukkan strain Staphylococcus epidermidis yang diketahui. Ia akan tumbuh dengan memuaskan mengembangkan jajahan merah jambu, dan mediumnya tetap sama warna atau gelap menjadi merah jambu yang lebih kuat.
Sebagai kawalan negatif, regangan digunakan yang tidak boleh tumbuh pada medium ini. Sebagai contoh, strain Escherichia coli atau Klebsiella pneumoniae yang diketahui boleh ditanam. Hasil yang diharapkan adalah penghambatan lengkap, iaitu, tidak ada pertumbuhan.
Selain itu, pinggan tanpa inokulasi mesti diinkubasi. Di dalamnya tidak boleh ada pertumbuhan atau perubahan warna.
Penting agar plat tidak digunakan jika terdapat tanda-tanda kemerosotan, seperti pencemaran, penyahhidratan, perubahan warna, antara lain.
Pemikiran terakhir
Semasa menggunakan medium agar manitol masin, ada beberapa aspek penting yang perlu dipertimbangkan:
- Memperoleh pertumbuhan koloni kuning tidak menunjukkan bahawa itu adalah Staphylococcus aureus. Perlu diingat bahawa sebilangan strain Enterococcus mampu tumbuh di media ini dan fermentasi manitol, serta batang Gram-positif yang membentuk spora tertentu.
Oleh itu, adalah mustahak untuk melakukan Gram di koloni dan ujian katalase.
-Sebaliknya, mesti dipertimbangkan bahawa spesies Staphylococcus lain selain aureus juga mampu menapai manitol. Oleh itu, penting untuk menumbuhkan koloni ke kaldu nutrien untuk mengambil dari sana dan melakukan ujian koagulase.
Antara spesies Staphylococcus yang mempunyai kepentingan klinikal bagi manusia yang melakukan fermentasi manitol adalah: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, antara lain.
Yang lain dapat memberikan reaksi yang berubah-ubah, iaitu kadang-kadang positif dan kadang-kadang negatif. Sebahagiannya ialah S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, antara lain.
-Tidak digalakkan mengambil koloni secara langsung dari agar manitol untuk melakukan ujian koagulase, kerana kepekatan garam yang tinggi dalam medium boleh mengganggu hasilnya.
-Akhirnya, disarankan untuk menginkubasi piring yang diberi manitol masin hingga 48 jam, kerana beberapa jenis S. aureus perlahan-lahan dapat memfermentasi manitol, walaupun ini tidak terlalu kerap.
Rujukan
- Makmal Britannia. Agar manitol masin. 2015. Terdapat di: britanialab.com
- "Agar manitol masin". Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 31 Okt 2018, 19:08 UTC. 17 Jan 2019, 20:55, boleh didapati di: es.wikipedia.org.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologi. (Edisi ke-5.) Argentina, Editor Panamericana SA
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Pengarang Panamericana SA
- Makmal BD. Garam BD Mannitol Agar. 2013. Terdapat di: bd.com.