The agar Salmonella Shigella juga dikenali sebagai SS agar adalah terpilih dan sederhana pengkamiran sederhana, terutama yang direka untuk pengasingan bakteria enteropatogenik genus Salmonella dan Shigella, kedua-dua sampel alam sekitar seperti klinikal.
Agar agar mempunyai komposisi yang kompleks; Ini terdiri dari ekstrak daging, peptone, laktosa, garam hempedu, natrium sitrat, natrium tiosulfat, ferrik sitrat, agar, merah netral, hijau terang dan air suling. Memandangkan kepekaannya yang luar biasa, sampel dengan flora campuran yang banyak dapat disemai.
Agar agar dengan koloni Salmonella sp. Sumber: Manurx27, dari Wikimedia Commons
Di makmal mikrobiologi, medium Salmonella-Shigella digunakan secara meluas untuk menyiasat kehadiran Salmonella dan Shigella dalam sampel najis diare, kumbahan, air minum dan makanan.
Kadang-kadang perlu menggunakan kaldu pra-pengayaan (kaldu laktosa) dan kaldu pengayaan (kaldu cystine selenit) untuk memulihkan keturunan Salmonella.
Langkah-langkah ini diperlukan ketika keberadaan Salmonella dalam jumlah yang sangat rendah dicurigai, atau di mana ketegangan mungkin disalahgunakan oleh proses pengeluaran industri, terutama makanan olahan. Juga disarankan untuk memperkaya sampel tinja dari pesakit yang telah dirawat dengan antibiotik.
Selepas itu, kaldu yang diperkaya dapat disemai pada agar Salmonella-Shigella dan media serupa lainnya, seperti agar xylose, lysine deoxycholate (XLD) dan agar Hektoen enterik (HE).
Asas
Setiap komponen media kultur Salmonella-Shigella mempunyai fungsi tertentu, dan campuran secara keseluruhan memberikannya sifat yang mencirikannya.
Kekuatan berkhasiat
Ekstrak daging dan peptone (dicerna dengan kasein dan tisu haiwan) menyediakan nutrien yang diperlukan (nitrogen, karbon dan vitamin) untuk pengembangan mikroorganisma yang mampu mentolerir sisa komponen.
Ketekalan
Agar-agar bertanggungjawab untuk memberikan konsistensi pepejal ke medium.
Selektif
Medium ini sangat selektif kerana mengandungi garam hempedu, natrium sitrat, dan hijau terang. Oleh itu, ia menghalang pertumbuhan semua bakteria Gram positif dan kebanyakan basil negatif Gram, termasuk beberapa koliform.
Walaupun bakteria genus Salmonella dan beberapa strain Shigella menyokong sebatian ini.
Terutama, gen Salmonella sangat tahan terhadap garam hempedu, sehingga dapat hidup di dalam pundi hempedu beberapa pesakit pembawa yang selalu menumpahkan bakteria di dalam najis mereka.
Pembezaan
Laktosa adalah karbohidrat yang boleh ditapai yang membantu membezakan strain penapaian laktosa daripada yang tidak fermentasi. Sifat ini dibuktikan dengan adanya penunjuk pH, yang dalam medium ini berwarna merah fenol.
Strain fermentasi laktosa memberikan koloni merah, sementara strain bukan fermentasi tidak berwarna. Ciri ini penting, kerana Salmonella dan Shigella tidak fermentasi laktosa.
Sebaliknya, media ini mengandungi natrium tiosulfat sebagai sumber sulfida dan ferrik sitrat sebagai sumber zat besi. Kedua-dua sebatian tersebut dapat membezakan bakteria yang mampu menghasilkan hidrogen sulfida. Ini bertindak balas untuk membentuk endapan sulfida besi besi yang kelihatan, tidak larut, dan hitam.
Harta ini terdapat di beberapa jenis genus Salmonella. Biasanya tanah jajahan mereka tidak rata dengan titik hitam di tengahnya. Selebihnya Salmonella tidak menghasilkan H 2 S dan berkembang sebagai koloni tanpa warna.
Sebaliknya, koloni genus Shigella tidak rata tanpa menghitam.
Penyediaan
Medium ini sangat mudah disediakan.
Timbang 63 g medium komersial yang mengalami dehidrasi dan larutkan dalam satu liter air suling. Panaskan larutan dan kacau. Campuran boleh mendidih hingga beberapa minit.
Medium ini tidak boleh ditutup secara automatik. Setelah larut, ia disajikan terus pada pinggan steril tunggal atau dua kali ganda.
Apabila padat, mereka disusun secara terbalik pada platelet dan disimpan di dalam peti sejuk (2-8 ° C) sehingga digunakan.
Medium selepas penyediaan hendaklah tetap pada pH 7.2 ± 0.2 dan dengan warna oren-merah.
Penting untuk membiarkan pinggan menjadi panas sebelum menyemai sampel. Sampel asal dapat disemai secara langsung, membuang bahan pada bahagian agar dan kemudian melecet dari situ.
Sekiranya menggunakan kaldu yang diperkaya, berikan sebahagian kaldu selenite dan taburkan dengan spatula drigalski.
Inkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam dalam aerobiosis.
Perlu diingat bahawa jumlah gram yang akan ditimbang dan pH akhir medium boleh berbeza dari satu rumah komersial ke rumah yang lain. Pangkalan tengah selalu memberikan petunjuk untuk penyediaannya.
Gunakan
Ia sering digunakan dalam analisis kultur najis dan dalam kajian mikrobiologi air sisa, air minum dan sampel makanan.
Kerap piring berganda disediakan, di satu sisi agar Salmonella-Shigella diletakkan dan di agar XLD yang lain.
Batasan
-Beberapa jenis Shigella tidak tumbuh dalam medium ini. Oleh itu, tidak digalakkan untuk pengasingan primer gen ini.
-Tidak setiap koloni telus dengan pusat hitam menunjukkan Salmonella; Ujian biokimia mesti dilakukan untuk membuat pengenalan yang betul, kerana koloni sebilangan strain Proteus tidak dapat dibezakan dengan yang dilakukan oleh Salmonella.
-Media dehidrasi mesti menjaga pendedahan kepada alam sekitar, kerana sangat hygroscopic. Oleh itu, ia mesti disimpan di tempat yang kering dan tertutup dengan baik. Buka untuk jangka masa yang sangat singkat.
-Sepanjang masa garam hempedu dalam medium dapat memendam, membentuk gambar yang serupa dengan tikar di dalam agar, tetapi ini tidak mempengaruhi hasilnya.
-Beberapa jenis Shigella dapat perlahan-lahan memfermentasi laktosa.
QA
Untuk membuktikan bahawa medium berfungsi dengan betul, disarankan untuk menanam ketegangan kawalan yang diketahui atau diperakui dan perhatikan apakah pertumbuhannya memenuhi ciri yang diharapkan.
Untuk ini, strain E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium atau Enterococcus faecalis dapat digunakan.
Hasil yang diharapkan adalah:
Enterobacter dan Klebsiella ------ koloni besar dan mukoid merah atau merah jambu.
Shigella flexneri ---------- koloni rata yang telus atau tidak berwarna.
Salmonella typhimurium ------ koloni tidak berwarna dengan pusat hitam.
Enterococcus faecalis -------- penghambatan total.
Rujukan
- Makmal Difco Francisco Soria Melguizo. Agar Salmonella-Shigella. 2009. Terdapat di: f-soria.es
- Makmal BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Terdapat di: bd.com
- Makmal Britannia. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Terdapat di: britanialab.com
- Diagnostik Valtek. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar). 2010. Terdapat di: andinamedica.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologi. Edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.