AGAR SOYA TRYPTICASEIN: RASIONAL, PENYEDIAAN, DAN PENGGUNAANNYA - BIOLOGI - 2026

The soya agar tryptone atau Trypticase Soy Agar ialah medium budaya yang kukuh, dan tidak terpilih pemakanan. Ia ditentukan oleh huruf TSA untuk singkatannya dalam Bahasa Inggeris Trypticase Soy Agar. Ia terdiri daripada triptein, peptone kedelai, natrium klorida, dan agar-agar.

Kerana khasiatnya yang tinggi, ia sangat sesuai untuk penanaman mikroorganisma yang sederhana dan tidak menuntut. Medium tanpa makanan tambahan tidak digalakkan untuk budaya primer, tetapi sangat berguna untuk subkultur strain tulen dan mengekalkannya, antara kegunaan lain.

Biji agar soya Trypticasein dalam tiub dengan penutup bakelite. Sumber: Gambar yang diambil oleh pengarang MSc. Marielsa Gil.

Juga, agar ini berfungsi sebagai asas untuk penyediaan media yang diperkaya seperti agar darah, terutama apabila diperlukan untuk memerhatikan corak hemolisis dan untuk memasang optoquine dan bacitracin taxa, yang diperlukan dalam diagnosis Streptococcus pneumoniae dan Streptococcus pyogenes masing-masing.

Sebaliknya, apabila digabungkan dengan antibiotik, berguna untuk mengasingkan mikroorganisma anaerobik fakultatif dan ketat yang penting secara klinikal dari sampel dengan flora campuran.

Akhirnya, komposisi agar-agar kedelai dan kinerjanya memenuhi syarat yang ditetapkan oleh farmakopia yang berbeza (Eropah, Jepun dan Amerika Utara).

Asas

Untuk pengembangan bakteria yang betul, kehadiran bekalan tenaga diperlukan, seperti asid amino, vitamin, asas puric dan pyrimidic.

Dalam pengertian ini, triptein dan peptone soya memberikan nutrien ini kepada mikroorganisma, sehingga memungkinkan perkembangannya sepenuhnya. Walau bagaimanapun, untuk bakteria cepat perlu menambah agar ini dengan darah yang terdefibrasi atau darah yang dihangatkan untuk meningkatkan pengayaannya.

Sebaliknya, jika antibiotik ditambahkan ke media, ia menjadi media selektif. Ekstrak ragi 0,6% juga dapat ditambahkan untuk memihak kepada pengasingan spesies genus Listeria, sementara penambahan cystine Tellurite dan darah domba sangat sesuai untuk Corynebacterium diphteriae.

Akhirnya, natrium klorida memberikan keseimbangan osmotik ke medium dan agar memberikan konsistensi pepejal.

Penyediaan

Pinggan Agar Soya Trypticasein

Untuk menyiapkan agar-agar kedelai triptisasein, 40 g medium komersial yang mengalami dehidrasi harus ditimbang dalam skala digital. Ia dilarutkan dalam satu liter air suling yang terdapat dalam termos.

Campuran dibiarkan berehat selama 5 minit dan kemudian dibawa ke sumber haba untuk membantu melarutkan medium. Ia mesti dikacau dengan kerap dan direbus selama 1 hingga 2 minit. Selepas itu, medium disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 ° C selama 15 minit.

Biarkan sejuk hingga 50 ° C dan sebarkan ke dalam piring Petri yang steril. Biarkan padat, terbalik, susun dalam plak dan simpan di dalam peti sejuk.

PH akhir medium mestilah 7.3 ± 0.2.

Perlu diperhatikan bahawa warna medium kultur dehidrasi berwarna kuning muda dan harus disimpan di antara 10 hingga 35 ° C, di tempat yang kering.

Untuk bahagiannya, agar yang disiapkan berwarna kuning muda. Plat siap hendaklah disimpan di dalam peti sejuk (2-8 ° C) sehingga digunakan.

Plat mesti mencapai suhu bilik sebelum digunakan.

Plat agar soya triptisasein ditambah dengan darah

Agar darah disiapkan dengan menambahkan darah defibrinasi 5% pada saat menyejukkan agar-agar soya triptikasein hingga 50 ° C. Campuran diselaraskan dengan memutar dengan gerakan lembut.

Hidangkan dalam hidangan Petri yang steril. Warna tengah mestilah merah ceri.

Plat agar kedelai triptikasein ditambah dengan darah yang dihangatkan

Untuk menyediakan agar darah berasaskan TSA, lakukan prosedur yang sama seperti yang telah dijelaskan, tetapi ketika meninggalkan autoklaf dibiarkan berehat sehingga suhu medium kira-kira antara 56 hingga 70 ° C. Pada masa itu darah diletakkan dan dicampurkan sehingga medium berubah menjadi coklat.

Hidangkan dalam hidangan Petri yang steril. Warna medium adalah coklat coklat.

Trypticasein Soy Agar Wedges

Prosedur penyediaan agar adalah sama seperti yang dijelaskan untuk pinggan, dengan perbezaan bahawa daripada menghidangkan medium pada piring Petri, ia diedarkan antara 10 hingga 12 ml dalam tiub dengan penutup Bakelite sebelum disterilkan.

Selepas itu, tiub ditutup secara automatik pada suhu 121 ° C selama 15 minit. Apabila mereka pergi, mereka cenderung dengan bantuan sokongan dan dibenarkan untuk memantapkan.

Baji yang disiapkan disemai mengikut luas permukaan dan berfungsi untuk memastikan mikroorganisma tertentu yang tidak menuntut dapat bertahan untuk jangka masa yang ditentukan.

Permohonan

Trypticasein Soy Agar digunakan dalam kes berikut:

-Sebagai asas untuk menyediakan agar darah klasik yang digunakan secara rutin di kebanyakan makmal.

-Pengasingan bakteria yang menuntut.

-Pemerhatian corak hemolisis.

-Laksanakan ujian diagnostik.

-Sebagai asas untuk menyediakan agar darah khas untuk Corynebacterium diphteriae, dengan cystine Tellurite dan darah domba.

-Sebagai asas untuk menyediakan agar darah domba, ditambah kanamycin-vancomycin untuk pertumbuhan anaerob, terutamanya Bacteroides sp.

- Untuk pemeliharaan regangan yang tidak menuntut (Bacterioteca).

- Kiraan mikrob aerobik dalam kajian had mikroba air, persekitaran, makanan dan sampel kosmetik.

Disemai

Sampel boleh disemai terus ke permukaan Trypticasein Soy Agar ditambah dengan darah atau bahan tambahan lain. Ia disemai oleh keletihan.

Manakala, piring agar-agar kedelai triptikasein tanpa bahan tambahan biasanya digunakan untuk menumbuhkan strain mikroba (bakteria atau ragi).

QA

Kawalan steril

Untuk memeriksa kemandulan pelbagai media yang disediakan dengan agar-agar asas typticasein, disyorkan yang berikut: dari setiap kumpulan yang disediakan, 1 atau 2 plat atau tiub yang tidak diinokulasi harus diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam untuk menunjukkan kemandulan mereka. Dalam semua kes, ia mesti kekal tanpa pertumbuhan.

Sekiranya terdapat pencemaran, keseluruhan kumpulan mesti dibuang.

Kawalan pertumbuhan

Strain bakteria berikut boleh digunakan untuk mengkaji fungsi agar-agar soya trypticasein yang betul: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 dan Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Strain ditanam dan diinkubasi secara aerobik pada suhu 37 ° C selama 24 jam.

Dalam semua kes, pertumbuhan mesti memuaskan.

Kulat seperti Candida albicans Complex ATCC 10231 dan Aspergillus niger ATCC 16404 juga boleh digunakan. Pertumbuhan yang baik dijangka untuk kedua-dua strain.

Kawalan pertumbuhan dan pola hemolisis agar soya triptisasein ditambah dengan darah

Untuk mengesahkan fungsi agar darah yang disediakan dengan asas ini, strain berikut dapat digunakan: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 dan Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Mereka disemai dan diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam mikroerofiliti selama 24 jam.

Dalam semua kes, pertumbuhan harus memuaskan, dengan mengambil kira bahawa beta-hemolisis (cahaya cahaya di sekitar koloni) harus diperhatikan pada S. pyogenes dan alpha hemolysis (halo kehijauan di sekitar koloni) harus diperhatikan pada kedua-dua strain S. pneumoniae. tanah jajahan).

Rujukan

1. Penyumbang Wikipedia. Trypticase saya agar. Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 17 Disember 2018, 15:47 UTC. Terdapat di: https://en.wikipedia.org
2. Makmal Britannia. Agar soya Triptein. 2015. Terdapat di: britanialab.com
3. Makmal Neogen. Agar-agar soya. Terdapat di: drinksafety.neogen.com
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Pengarang Panamericana SA
5. Makmal BD. Trypticase Saya Agar. 2014. Terdapat di: .bd.com