XLD AGAR: RASIONAL, PENYEDIAAN, DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2025

The agar XLD atau Xylose Lysine desoxycholate agar sederhana adalah terpilih dan budaya pepejal berbeza bagi pengasingan enteropathogens. Taylor merancang formula agar agar (Xylose, Lysine) XL untuk memperbaiki pengasingan gen Shigella.

Dia memerhatikan bahawa gen ini dihambat di kebanyakan media yang bertujuan untuk pengasingan enteropatogen. Selepas itu, natrium deoksiatolat, natrium tiosulfat dan ferum ammonium sitrat ditambahkan untuk meningkatkan selektivitasnya. Formula ini terbukti berguna untuk pengasingan Shigella dan Salmonella.

Perbezaan koloni Shigella, Salmonella dan koliform pada agar XLD. A. Shigella sp, B. Salmonella sp, C. Coliforms. Sumber: A. Oleh: CDC / Amanda Moore, MT; Todd Parker, PhD; Audra Marsh, Dengan hormat: Perpustakaan Imej Kesihatan Umum B. https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/Salmonella_species_growing_on_XLD_agar_-_Showing_H2S_production_-_Detail.jpg C. Oleh: CDC / Dr. Petani JJ, Kesopanan: Perpustakaan Imej Kesihatan Awam

Agar XLD terdiri daripada ekstrak ragi, natrium deoksikolat, xilosa, lisin, laktosa, sukrosa, natrium tiosulfat, ferum ammonium sitrat, natrium klorida, fenol merah dan agar. XLD agar dan SS agar duo digunakan di kebanyakan makmal bakteriologi untuk mengkaji sampel tinja untuk Shigella dan Salmonella.

Makmal lain lebih suka gabungan CHROMagar Salmonella dan XLD agar, antara pilihan lain yang ada. Duo ini boleh disediakan dalam hidangan Petri berganda. Di satu sisi mereka meletakkan agar XLD dan di seberang media pilihan lain.

Asas

-Kekuatan nutrien

XLD agar mempunyai ekstrak ragi, yang berfungsi sebagai sumber nutrien bagi mikroorganisma yang tumbuh pada agar ini. Di samping itu, kehadiran karbohidrat (xilosa, sukrosa dan laktosa) memberi tenaga kepada bakteria yang dapat menapai mereka.

-Pemilihan medium

Sebagai bahan penghambat, ia mengandungi sodium deoxycholate; Ini menghalang pertumbuhan bakteria Gram positif, memberi medium selektif.

-Perbezaan daya

Jajahan Shigella khas

Seperti yang telah disebutkan, agar XLD mengandungi xylose; Karbohidrat ini diperam oleh semua bakteria yang tumbuh di medium ini kecuali gen Shigella.

Ini adalah salah satu ciri yang memberikannya karakter pembeza, kerana koloni Shigella dibezakan dari yang lain dengan mengembangkan koloni merah, sementara bakteria lain menghasilkan koloni kuning.

Jajahan khas Salmonella

Genus Salmonella juga memanaskan xylose, pada mulanya menghasilkan koloni kuning. Walau bagaimanapun, setelah menghabiskan xylose karbohidrat, ia menyerang lisin untuk enzimnya lisin decarboxylase. Dekarboksilasi lisin menghasilkan alkali yang mengubah warna koloni dan medium sekitarnya menjadi merah semula jadi.

Tingkah laku ini hanya dilakukan oleh Salmonella, kerana koliform yang decarboxylate lysine tidak dapat alkali media. Ini kerana koliform juga menetap laktosa dan sukrosa yang ada; oleh itu, penghasilan asid sangat tinggi, meninggalkan koloni kuning dalam bakteria ini.

Perlu diperhatikan bahawa genus Salmonella tidak fermentasi sukrosa atau laktosa.

Pengeluaran H

Agar XLD juga membolehkan pengesanan spesies Salmonella yang menghasilkan H ₂ S; Untuk ini, ia bergantung pada sumber sulfur yang diwakili oleh natrium tiosulfat dan pengembang tindak balas, yang merupakan ferum ammonium sitrat.

Yang bertindak balas kedua dengan H ₂ S (gas tidak berwarna) dan bentuk yang boleh dilihat mendakan hitam larut besi sulfat. Dalam pengertian ini, ciri-ciri koloni salmonella akan berwarna merah dengan pusat hitam.

Ia harus diperhatikan bahawa untuk H ₂ S pembentukan tindak balas berlaku , mempunyai pH alkali diperlukan. Itulah sebabnya Enterobacteriaceae lain yang membentuk H ₂ S tidak dapat melakukannya atau tidak melakukannya dengan baik dalam medium ini, kerana keasidan tinggi yang dihasilkan dengan fermentasi karbohidrat yang ada menghalang atau menghalang reaksi.

-Sodium klorida, agar dan fenol merah

Akhirnya, natrium klorida mengekalkan keseimbangan osmotik; agar adalah agen pemejalan dan fenol merah mengesan perubahan pH, mengubah warna koloni dan medium.

Penyediaan

Timbang 55 g medium XLD dehidrasi dan larutkan dalam 1 liter air. Panaskan dan kacau campuran sehingga mencapai titik didih. Jangan terlalu panas, kerana haba merosakkan medium dan menimbulkan endapan yang mengubah morfologi koloni khas.

Medium ini tidak boleh ditutup secara automatik. Semasa larut, ia mesti disalurkan ke tempat mandi air pada suhu 50 ° C. Semasa menyejukkan, ia mesti disajikan secara langsung pada piring Petri yang steril. Mereka boleh dituangkan ke dalam pinggan tunggal atau pinggan berganda. Mereka dibiarkan mengeras dan disimpan di dalam peti sejuk sehingga digunakan.

Temper sebelum digunakan. Oleh kerana ia adalah medium yang tidak steril, disarankan untuk menyediakannya hampir dengan tarikh penggunaan.

PH akhir medium mestilah 7.4 ± 0.2. Warna medium yang disediakan berwarna oren-merah, lut sinar, tanpa mendakan.

Sekiranya anda mempunyai agar-agar asas Xylose Lysine (XL), anda boleh menambahkan sodium deoxycholate, sodium thiosulfate dan iron ammonium sitrat. Dengan cara ini, formula agar XLD diperolehi.

Permohonan

XLD agar digunakan untuk pemulihan enteropathogen, terutamanya dari genus Shigella dan kedua dari genus Salmonella. Ia berguna untuk menilai sampel najis, air dan makanan.

Jenis sampel

Najis

Sampel najis dapat disemai secara langsung pada agar XLD, membuat pengedaran bahan yang baik untuk mendapatkan koloni terpencil.

Untuk meningkatkan pemulihan Salmonella, agar XLD dapat diambil dari media pengayaan Salmonella.

Makanan

Untuk makanan, kaldu pengayaan untuk Salmonella dan Shigella dapat digunakan. Untuk Salmonella anda boleh menggunakan kaldu cystine selenite, kaldu tetrathionate hijau terang, antara lain.

Dalam kasus Shigella, dapat diperkaya dengan kaldu Shigella dengan 0,5 µ / ml novobiocin, diinkubasi pada suhu 42 ° ± 1 ° C selama 16-20 jam.

Air

Dalam analisis air, teknik penapisan membran dan penggunaan agar XLD dianjurkan, antara lain.

Keadaan penanaman dan pengenalpastian

Medium benih diinkubasi secara aerobik pada suhu 35 ° C selama 24 hingga 48 jam.

Koloni khas setiap genus diperhatikan, koloni yang mencurigakan harus menjalani ujian biokimia untuk pengenalannya.

QA

Untuk menilai kawalan kualiti medium, strain bakteria berikut dapat digunakan: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella abony DSM 4224, Shigella flexneri ATCC 12022, Shigella sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC , Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

Genus Salmonella dicirikan dengan menghadirkan koloni merah dengan pusat hitam atau koloni hitam sepenuhnya pada medium ini. Manakala, dalam gen Shigella, koloni mestilah berwarna merah, iaitu warna medium.

Dalam kes Escherichia coli, ia diharapkan dapat dihambat secara keseluruhan atau sebahagian; jika tumbuh tanah jajahan berwarna kuning. Bagi Proteus mirabilis, pertumbuhan yang buruk dijangkakan dengan koloni merah jambu dengan atau tanpa pusat hitam. Akhirnya gen Klebsiella akan tumbuh sebagai jajahan kuning.

Pemikiran terakhir

Agar XLD banyak digunakan di makmal bakteriologi kerana kecekapan tinggi untuk pemulihan Shigella dan juga mempunyai pemulihan genus Salmonella yang baik.

Rall et al. (2005) dalam karya mereka yang bertajuk "Penilaian tiga kaldu pengayaan dan lima media padat untuk mengesan Salmonella pada unggas" menunjukkan bahawa dari 3 media klasik yang diuji (agar hijau terang, agar SS dan agar XLD) , Agar XLD mempunyai kadar pemulihan yang terbaik.

Peratusan pemulihan adalah seperti berikut: 13.8% untuk agar hijau terang, 27.6% untuk SS, dan 34.5% untuk XLD. Rambach agar dengan pemulihan 48% dan CHROMagar dengan 79.3% hanya dikalahkan oleh media kromogenik.

Rujukan

1. Penyakit bawaan makanan. Shigellosis. Terdapat di: anmat.gov.ar
2. "Agar XLD." Wikipedia, Ensiklopedia Percuma. 9 Feb 2019, 11:46 UTC. 10 Apr 2019, 19:25 wikipedia.org
3. Makmal BBL. CHROMagar Salmonella / BD XLD Agar (biplate). 2013 Terdapat di: bd.com
4. Makmal Neogen. Agar XLD. Terdapat di: drinksafety.neogen
5. Makmal Francisco Soria Melguizo. Agar XLD. Terdapat di: http://f-soria.es/Inform
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Penilaian tiga kaldu pengayaan dan lima media penyaduran untuk pengesanan Salmonella pada unggas. Kurang ajar. J. Microbiol. 2005; 36 (2): 147-150. Boleh didapati dari: scielo.br
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.