AIR PEPTONE: RASIONAL, PENYEDIAAN DAN PENGGUNAANNYA - BIOLOGI - 2026

The air pepton adalah medium pengayaan cecair, tidak terpilih, terutamanya yang digunakan sebagai sampel makanan pelarut atau bahan-bahan lain. Medium ini dari sudut pandang kimia sangat mudah, ia mengandungi peptone daging, natrium klorida dan air.

Ia mempunyai nilai pemakanan tertentu, memungkinkan untuk memperkayakan sampel. Sekiranya terdapat bakteria yang disalahgunakan, medium ini mempunyai kekuatan untuk memperbaiki daya maju. Ia sangat berguna dalam pemulihan bakteria yang tergolong dalam keluarga Enterobacteriaceae.

Air peptone dalam botol. Sumber: MSc. Marielsa gil

Sekiranya pemulihan Salmonellas, penggunaan varian air peptone buffet adalah disyorkan; Ini berfungsi sebagai media pra-pengayaan untuk sampel, dalam hal ini mengandung unsur-unsur lain seperti disodium fosfat dan dipotassium fosfat.

Biasanya air peptone disiapkan pada pH netral, namun ada varian lain di mana perlu agar pH menjadi 8,5 ± 0,2 (alkali), kerana bakteria yang akan diasingkan bersifat alkali, seperti Vibrio cholerae.

Selanjutnya, medium ini boleh digunakan sebagai medium asas untuk ujian penapaian karbohidrat.

Asas

Pepton menyediakan nutrien yang diperlukan untuk pertumbuhan bakteria, terutama nitrogen dan asid amino rantai pendek, sementara natrium klorida mengekalkan keseimbangan osmotik.

Selanjutnya, media memungkinkan untuk menyebarkan, menghomogenkan dan memperbaiki sel-sel bakteria yang telah rosak oleh proses industri.

Sebagai pelarut, ia adalah ideal, dengan berkesan menggantikan larutan fisiologi (SSF) atau larutan penimbal fosfat (PBS).

Pertumbuhan bakteria dapat dilihat dengan memerhatikan kekeruhannya.

Penyediaan

Penyediaan buatan sendiri (bukan komersial)

Timbang 1 g peptone dan 8.5 g natrium klorida, larutkan dalam 1 liter air suling. PH harus disesuaikan ke 7.0. Untuk ini, natrium klorida 1N boleh digunakan.

Penyediaan menggunakan medium komersial

Timbang 15 g medium dehidrasi dan larutkan dalam satu liter air suling. Homogenkan campuran. Sekiranya perlu, campuran direbus selama 1 minit untuk membantu pembubaran total. Hidangkan dalam botol 100 ml atau tiub 10 ml mengikut keperluan. Autoklaf pada suhu 121 ° C selama 15 minit.

Sejukkan dan gunakan atau simpan di dalam peti sejuk. PH akhir medium ialah 7.2 ± 0.2.

Warna medium dehidrasi berwarna kuning muda dan medium yang disediakan berwarna kuning muda.

Persediaan untuk ujian penapaian

Untuk penyediaan sebelumnya - sebelum disterilkan - karbohidrat mesti ditambahkan ke kepekatan akhir 1%, ditambah penunjuk Andrade (asid fuchsin) atau fenol merah (0,018 g / L). Tiub harus dilengkapi dengan loceng Durham untuk memerhatikan pembentukan gas.

Varian lain dari air peptone

Air peptone yang disangga atau disangga

Ia mengandungi hidrolisis enzimatik kasein, natrium klorida, dihidrogen kalium fosfat dan natrium hidrogen fosfat dodecahydrate. PH akhir ialah 7.0 ± 0.2.

Untuk penyediaannya, timbang 20 g medium dehidrasi dan larutkan dalam 1 liter air suling. Biarkan berehat selama kira-kira 5 minit. Panaskan selama 1 minit sehingga larut sepenuhnya.

Tuangkan ke dalam balang yang sesuai mengikut keperluan. Sterilkan menggunakan autoklaf pada suhu 121 ° C selama 15 minit.

- Air peptone alkali

Timbang 25 g medium dehidrasi dan larutkan dalam 1 liter air. Teruskan seperti yang dijelaskan di atas. PH antara 8.3 hingga 8.7.

Gunakan

Inokulum dilakukan dengan meletakkan sampel secara langsung.

Ini digunakan untuk mencairkan sampel, terutama jika diduga ada bakteria yang rosak. Biasanya pencairannya adalah 1:10 dan 1: 100.

Inkubasi selama 24 jam dalam aerobiosis pada suhu 35-37 ° C.

Sampel najis

Untuk sampel najis untuk Salmonella, penggunaan air penyangga atau penyangga disarankan sebagai media pra-pengayaan.

Untuk melakukan ini, lakukan seperti berikut:

Sekiranya najis terbentuk, ambil 1 g sampel. Sekiranya mereka cair, ambil 1 ml tinja dan gantungkan ke dalam tiub dengan 10 ml air peptone yang sudah siap. Sekiranya terdapat sapu rektum, masukkan bahan yang terdapat di dalam sapu ke dalam tiub dengan air peptone yang disangga.

Dalam semua kes, campurkan dan homogenkan sampel dengan baik.

Inkubasi pada suhu 37 ° C selama 18 hingga 24 jam. Selepas itu subkultur dalam kaldu pengayaan seperti kaldu cystine selenite atau kaldu tetrathionate pada suhu 37 ° C selama 18-24 jam lebih. Akhirnya, tanam dalam media selektif untuk Salmonella, seperti agar SS, agar XLD, agar Hektoen, antara lain.

Contoh makanan

Air peptone digunakan sebagai media pengayaan atau sebagai pengencer sederhana, tetapi jika spesies Salmonella dicari, ia digunakan sebagai media pengayaan, seperti yang telah dijelaskan.

Dalam makanan teruskan seperti berikut:

Untuk makanan pejal seberat 25 g sampel dan untuk makanan cair ukur 25 ml daripadanya. Letakkan bahagian tersebut dalam termos yang mengandungi 225 ml air peptone. Campurkan dan homogenkan sampel.

Sekiranya beban mikroba disyaki tinggi, pencairan siri atau perpuluhan dapat dibuat untuk memudahkan penghitungan unit pembentuk koloni (CFU).

Jumlah pencairan akan bergantung pada jenis sampel dan pengalaman penganalisis.

Sekiranya, sebaliknya, disyaki bahawa beban mikroba sangat rendah, tidak perlu melakukan pencairan. Selepas itu, subkultur pada media terpilih.

Sekiranya makanan dari laut, seperti kerang, ikan, antara lain, untuk mencari Vibrio cholerae atau spesies Vibrio lain, air peptone yang disesuaikan dengan pH 8.5 (air peptone alkali) harus digunakan.

QA

Dari setiap kumpulan yang disediakan, satu hingga dua tabung harus diinkubasi tanpa inokulasi selama 24 jam dalam aerobiosis pada suhu 37 ° C. Pada penghujung waktu, tidak ada kekeruhan atau perubahan warna yang harus diperhatikan.

Strain kawalan yang diketahui juga boleh digunakan untuk menilai keberkesanannya:

Untuk ini, strain bakteria berikut dapat digunakan: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella enteritidis ATCC 13076.

Dalam semua kes diharapkan perkembangan mikroba yang memuaskan, yang diperhatikan oleh kekeruhan medium.

Batasan

-Media dehidrasi sangat hygroscopic, jadi ia mesti dijauhkan dari kelembapan.

-Media tidak boleh digunakan jika terdapat sebarang kemerosotan.

-Media kultur dehidrasi hendaklah disimpan antara 10 - 35 ° C

-Media yang disediakan mesti disimpan dalam keadaan sejuk (2-8 ° C).

Rujukan

1. Camacho A, Giles M, Ortegón A, Palao M, Serrano B dan Velázquez O. Teknik untuk Analisis Mikrobiologi Makanan. 2009, edisi ke-2. Fakulti Kimia, UNAM. Mexico. Versi untuk Manual dan Dokumen Pentadbir (AMyD) Fakulti Kimia, UNAM 1. Terdapat di: http://depa.fquim.unam.mx
2. Makmal Britannia. Air peptone buffet. 2015. Terdapat di: britanialab.com
3. Makmal Neogen. Air peptone. Terdapat di: drinksafety.neogen.com
4. Makmal Britannia. Air peptone. 2015. Terdapat di: britanialab.com
5. Makmal Merck. Air peptone yang disangga. Terdapat di: merckmillipore.com
6. Makmal Conda Pronadisa. Air peptone beralkali. Terdapat di: condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.