The smear adalah alat diagnostik untuk batuk kering aktif. Ini adalah teknik makmal yang memungkinkan pengesanan dan pengukuran basil cepat asid seperti Mycobacterium tuberculosis. Ini adalah kaedah yang paling banyak digunakan di seluruh dunia untuk membuat diagnosis tuberkulosis paru-paru aktif di masyarakat dan untuk menilai faedah rawatan.
Tuberkulosis paru adalah penyakit berjangkit yang disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis yang menjangkiti paru-paru tetapi boleh mempengaruhi organ dan sistem lain. Di seluruh dunia, lebih daripada 6 juta orang menderita tuberkulosis paru-paru (TB).
Sel M. tuberculosis dalam dahak dahak (Sumber: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) melalui Wikimedia Commons)
Mycobacterium tuberculosis dan spesies Mycobacterium bukan tuberkulosis lain mempunyai lapisan lipid di dinding sel yang kaya dengan asid mikolik, yang tahan terhadap perubahan warna alkohol asid setelah diwarnai dengan pewarna asas.
Oleh itu, kaedah pewarnaan khas seperti kaedah Ziehl-Neelsen digunakan. Kaedah sederhana dan murah ini memungkinkan dinding mengekalkan noda ketika sampel dibilas dengan larutan asid, dan dinding Mycobacterium berubah menjadi merah berbeza dengan bakteria lain yang berubah menjadi biru.
Untuk melakukan mikroskopi smear, sampel dahak diperlukan, sebaiknya diambil pada waktu pagi ketika anda bangun. Sampel tisu atau sampel cecair badan juga boleh digunakan.
Proses
Sampel yang akan diproses untuk mikroskop smear adalah sampel dahak, sampel tisu, atau sampel cairan tubuh. Sampel tisu boleh diekstraksi dengan bronkoskopi atau dengan biopsi kelenjar getah bening atau tisu lain.
Kerana tuberkulosis dapat mempengaruhi organ atau sistem apa pun, sampelnya sangat bervariasi, termasuk: sampel air kencing, cairan serebrospinal, cairan pleura, cairan ascites, darah, nanah dari rongga terbuka, biopsi , dan lain-lain.
Spesimen lesi ekstrapulmonari juga harus diproses untuk kultur. Sampel dahak dikumpulkan pada waktu pagi setelah meningkat.
Beberapa sampel dapat dikumpulkan berturut-turut atau pada hari berturut-turut. Sampel mesti dilabelkan dalam botol mulut tertutup. Mereka harus mempunyai data pesakit, jenis sampel dan tarikh pengumpulan sampel.
Prosedur teknikal
- Setelah sampel diperoleh, ia boleh disentrifugasi untuk pekat atau digunakan secara langsung. Prosedur awal terdiri daripada meletakkan beberapa tetes sampel dan menyebarkannya pada slaid.
- Sampel ditutup dengan fuchsin yang disaring (larutan pewarnaan).
- Kemudian dipanaskan hingga memperoleh kira-kira tiga pelepasan wap keputihan.
- Tunggu lima minit sehingga sampel sejuk dan basuh dengan air.
- Ia ditutup dengan larutan pemutihan (alkohol asid) selama 2 minit.
- Ia dibasuh lagi dengan air.
- Sampel ditutup dengan metilena biru dan dibiarkan selama satu minit.
- Basuh dengan air.
- Biarkan kering di udara dan teruskan ke pemerhatian di bawah mikroskop.
Foto dari mikroskop (Gambar oleh Konstantin Kolosov di www.pixabay.com)
Prosedur ini cepat, sederhana, murah, dan membolehkan sel Mycobacterium tuberculosis berwarna merah. Teknik ini dipanggil teknik pewarnaan Ziehl-Neelsen.
Pemerhatian mikroskopik terdiri daripada mengenal pasti kehadiran basil cepat asid dan pengukurannya mengikut bidang.
Sel-sel Mycobacterium tuberculosis muncul sebagai batang merah, berbutir, melengkung pada latar belakang biru. Mereka boleh diasingkan, dipasangkan atau dikumpulkan. Pemerhatian harus dilakukan mengikut ladang dan sekurang-kurangnya 100 ladang harus diperiksa untuk setiap smear.
Hasilnya dianggap positif apabila terdapat, di setiap bidang, lebih dari 10 sel tuberkulosis M. Ini sepadan dengan 5,000 hingga 100,000 bacilli untuk setiap mililiter sampel.
Dalam kes-kes ini, dianggap positif untuk Mycobacterium tuberculosis, kerana Mycobacterium yang tidak berlemak atau bakteria tahan asid lain mempunyai bentuk yang berbeza dan secara amnya jumlah yang diperhatikan setiap bidang kurang dari 10.
Orang yang memeriksa sampel mesti mempunyai pengalaman atau kepakaran dalam pengesanan dan pengiktirafan mikroorganisma ini, kerana negatif atau positif palsu mungkin ada dalam hasilnya.
Terdapat teknik fluoroskopi lain yang lebih sensitif, tetapi jauh lebih mahal. Salah satu teknik tersebut menggunakan pewarnaan Auramine-O untuk mendapatkan pendarfluor hijau atau pewarnaan Auramine O / Rhodamine B untuk memerhatikan pendarfluor kuning / oren.
Kes positif biasanya dijalankan untuk kultur dan antibiogram untuk mengesahkan diagnosis dan pemilihan rawatan yang sesuai.
Untuk apa mikroskopi smear?
Tuberkulosis adalah penyakit berjangkit yang menyerang paru-paru dan sistem organ dan organ badan yang lain. Ini adalah penyakit berjangkit yang menyebabkan kecederaan serius pada sistem pernafasan yang, jika tidak dirawat dengan baik, dapat menyebabkan kematian pesakit.
Tuberkulosis ditularkan hampir secara eksklusif melalui tetesan yang digantung di udara dari ekspektasi pesakit yang dijangkiti tuberkulosis paru. Titisan kecil ini dapat bertahan di udara dan memiliki kemampuan untuk menjangkiti orang yang menghirupnya.
Sel M. tuberculosis (Sumber: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) melalui Wikimedia Commons)
Jangkitan memerlukan masa hubungan yang berpanjangan dengan pesakit yang dijangkiti yang terus-menerus memuntahkan bacilli di persekitaran yang tidak berventilasi buruk. Orang yang mempunyai kekurangan imun cenderung untuk dijangkiti.
Pesakit HIV-positif lebih cenderung daripada penduduk lain untuk mengembangkan jangkitan pernafasan yang serius, termasuk tuberkulosis paru. Oleh itu, pentingnya mikroskopi smear sebagai kaedah diagnostik yang cepat dan murah untuk tuberkulosis.
Mikroskopi smear memungkinkan diagnosis bakteriologi tuberkulosis dibuat, namun hasil positif mesti disahkan dengan kajian lain.
Kajian yang mengesahkan diagnosis tuberkulosis termasuk pemeriksaan radiologi yang menunjukkan gambaran ciri di lobus atas paru-paru, ujian tuberkulin positif, dan kultur sampel positif.
Smear negatif
Mikroskop smear negatif tidak semestinya mengesampingkan diagnosis tuberkulosis, kerana terutama ketika sampel adalah dahak, penghapusan bacilli tidak berterusan. Oleh itu, dalam kes-kes ini, apabila diagnosis dicurigai, diperlukan sampel bersiri.
Smear positif
Mikroskopi smear positif menunjukkan tuberkulosis dan mesti disahkan dengan kajian pelengkap lain. Apabila hasilnya positif, budaya dan antibiogram harus dilakukan.
Setelah rawatan dibuat, penurunan yang berterusan dalam skala positif mikroskopi smear sehingga memperoleh hasil negatif, memungkinkan untuk mengawal manfaat rawatan.
Rujukan
- Aziz, MA (2002). Penilaian kualiti luaran untuk mikroskopi smear AFB.
- Desikan, P. (2013). Mikroskopi dahak pada tuberkulosis: adakah masih relevan ?. Jurnal penyelidikan perubatan India, 137 (3), 442.
- Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL, & Loscalzo, J. (2012). Prinsip perubatan dalaman Harrison (Vol. 2012). DL Longo (Ed.). New York: Mcgraw-hill.
- Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… & Muvunyi, CM (2016). Prestasi diagnostik mikroskop smear dan peningkatan hasil Xpert dalam mengesan tuberkulosis paru di Rwanda. Penyakit berjangkit BMC, 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosarys, MM, Díaz, R., & Mederos, LM (2016). Kepentingan kawalan kualiti bacilloscopy di makmal yang melakukan diagnosis tuberkulosis. Chili Journal of Infectology: Organ Rasmi Persatuan Infectology Chile, 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). Manual untuk diagnosis bakteriologi tuberkulosis: standard dan panduan teknikal: bahagian 1 mikroskop smear. Dalam Manual untuk diagnosis bakteriologi tuberkulosis: standard dan panduan teknikal: bahagian 1 mikroskop smear (hlm. 64-64).