- Untuk apa kromatogram?
- Pengenalpastian bahan
- Pengelasan ketulenan bahan
- Kuantiti bahan
- Jenis-Jenis
- Kromatogram di atas kertas atau lapisan nipis
- Kromatogram yang dihasilkan oleh pengesan
- Kromatogram pembezaan
- Kromatogram integral
- Rujukan
The chromatogram adalah rekod grafik dua dimensi diperolehi pada medium penyerap, menunjukkan pengasingan bahan-bahan oleh kromatografi. Corak, puncak atau bintik yang kelihatan, terbentuk pada kromatogram, yang mencerminkan pemisahan fizikal komponen campuran.
Angka yang lebih rendah adalah kromatogram dengan tiga puncak, A, B dan C, dari tiga komponen sampel yang dipisahkan dengan kromatografi. Masing-masing dari tiga puncak tersebut diperhatikan memiliki ketinggian dan lokasi yang berbeza pada paksi waktu kromatogram.

Kromatogram khas. Sumber: Heliagon, dari Wikimedia Commons
Paksi ordinat atau Y merekodkan maklumat intensiti isyarat (dalam milivolt mV dalam kes ini). Merupakan catatan, bergantung pada pengesan, beberapa harta fizikal bahan atau komponen campuran yang berasingan.
Ketinggian puncak sebanding dengan kepekatan komponen yang dipisahkan dari sampel dalam sistem yang optimum. Oleh itu, sebagai contoh, mudah untuk membayangkan bahawa komponen B berada dalam perkadaran yang lebih tinggi daripada A dan C.
Pada sumbu abs atau X, masa pengekalan komponen sampel atau campuran ditunjukkan. Ini adalah masa yang berlalu dari suntikan sampel sehingga berhenti, yang berbeza untuk setiap bahan tulen.
Untuk apa kromatogram?
Ini adalah catatan akhir keseluruhan proses kromatografi. Parameter yang mempunyai kepentingan analitik diperoleh darinya. Ini boleh didapati sebagai fail elektronik, histogram bercetak atau pada media proses; di atas kertas, misalnya.
Paksi Y dihasilkan oleh pengesan tindak balas isyarat atau intensiti, seperti spektrofotometer. Analisis optimum masa, ciri puncak atau titik yang diperoleh adalah penting; ukuran, lokasi, warna, antara aspek lain.
Analisis kromatogram umumnya memerlukan penggunaan kawalan atau piawaian, bahan identiti dan kepekatan yang diketahui. Analisis kawalan ini memungkinkan untuk dibuat dengan membandingkan dengan sampel ciri komponen sampel yang disiasat.
Dalam kromatogram anda dapat melihat dan menganalisis bagaimana pemisahan komponen campuran dilakukan. Kajian optimumnya memungkinkan untuk mengenal pasti bahan, menunjukkan kesuciannya, mengukur jumlah bahan yang terdapat dalam campuran, antara aspek lain.
Maklumat yang diambil dapat bersifat kualitatif; sebagai contoh, apabila bahan dikenal pasti dan kemurniannya ditentukan. Maklumat kuantitatif berkaitan dengan penentuan bilangan komponen dalam campuran dan kepekatan analit yang dipisahkan.
Pengenalpastian bahan
Dengan menganalisis hasil kromatogram, pelbagai bahan dapat dikenal pasti dengan membandingkan masa penahan dengan bahan yang diketahui. Ia dapat diperhatikan jika bahan yang dikaji bergerak dalam jarak yang sama jika mempunyai masa yang sama dengan bahan yang diketahui.
Sebagai contoh, kromatogram dapat mengesan dan mengenal pasti metabolit ubat seperti perangsang dan steroid dalam air kencing atlet. Ini adalah sokongan penting dalam kajian dan penyelidikan beberapa metabolit yang dihasilkan oleh gangguan genetik pada bayi baru lahir.
Kromatogram memudahkan pengesanan hidrokarbon halogen yang terdapat di dalam air minuman, antara bahan lain. Ini penting dalam analisis makmal kawalan kualiti, kerana ia memungkinkan untuk mengesan dan mengenal pasti bahan cemar yang terdapat dalam pelbagai produk.
Pengelasan ketulenan bahan
Dalam kromatogram anda dapat membezakan antara bahan tulen dan tidak murni. Bahan tulen akan menghasilkan puncak tunggal pada kromatogram; sedangkan bahan yang tidak murni akan menghasilkan dua atau lebih puncak.
Dengan menyesuaikan keadaan di mana kromatografi dilakukan, dua bahan dapat dicegah dari membentuk puncak tunggal.
Kuantiti bahan
Dengan menganalisis luas puncak kromatogram, kepekatan komponen sampel dapat dikira.
Oleh itu, kawasan puncak berkadar dengan jumlah bahan yang terdapat dalam sampel. Data kuantitatif ini diperoleh dalam sistem yang sangat sensitif, seperti yang dihasilkan oleh kromatografi gas atau cecair, misalnya.
Jenis-Jenis
Salah satu klasifikasi kromatogram berkait rapat dengan pelbagai jenis kromatografi, yang menghasilkan kromatogram yang sesuai.
Bergantung pada keadaan berjalan, pengesan, antara aspek lain, kromatogram akan berbeza-beza dalam kandungan dan kualitinya.
Kromatogram di atas kertas atau lapisan nipis
Kromatogram dapat dihasilkan secara langsung di atas kertas atau lapisan nipis, secara langsung menunjukkan pembahagian atau taburan komponen sampel.
Ia sangat berguna untuk pemisahan dan kajian bahan berwarna yang mempunyai pigmen semula jadi, seperti klorofil. Bahan ini dapat mengalami proses pengembangan jika bahan tersebut tidak memiliki warna alami, dan berguna untuk kajian kualitatif.
Kromatogram yang dihasilkan oleh pengesan
Kromatogram juga dapat diperoleh dengan menggunakan alat pengesan yang mencatat tindak balas, output, atau isyarat akhir kromatografi. Seperti yang telah disebutkan sebelumnya, pengesan ini biasanya spektrofotometer, spektrometer massa, jujukan automatik, elektrokimia, antara lain.
Kromatogram yang dihasilkan dalam lajur, sama ada gas atau cecair, serta resolusi tinggi di lapisan nipis, menggunakan alat pengesan.
Bergantung pada jenis pengesan, kromatogram dapat diklasifikasikan sebagai pembezaan atau integral, bergantung pada bentuk tindak balas pengesan.
Kromatogram pembezaan
Pengesan pembezaan secara berterusan mengukur isyarat tindak balas dari kromatogram, sementara pengesan integral mengukur isyarat yang sepadan.
Kromatogram pembezaan adalah kromatogram yang diperolehi oleh pengesan pembezaan. Pengesan ini merangkumi, misalnya, spektrofotometer dan pengesan untuk perubahan kekonduksian elektrik.
Jenis kromatogram ini telah menunjukkan hasil pemisahan anion dari sampel, yang dikesan oleh fotometri tidak langsung. Hasil yang sama juga telah diperoleh untuk kajian ion, sebagai contoh, dengan pengesanan akhir dengan konduktor.

Kromatogram pembezaan. Sumber: Pixabay
Grafik atas menunjukkan contoh kromatogram pembezaan, yang diperolehi oleh jujukan DNA automatik (asid deoksiribonukleik). Grafik dengan jelas menunjukkan puncak empat warna, satu warna untuk setiap asas nitrogen dalam DNA.
Melalui sokongan program berkomputer, penafsiran urutan asas DNA yang dianalisis difasilitasi, dan juga untuk analit yang lebih kompleks.
Kromatogram integral
Kromatogram integral sesuai dengan yang diperoleh oleh pengesan integral. Kromatogram ini menunjukkan output komponen tunggal yang sedang dikaji. Pelbagai puncak tidak diperoleh seperti dalam pembezaan.
Dalam kromatogram integral, catatan diperoleh dengan bentuk yang digambarkan sebagai langkah. Bentuk ini adalah bahagian kromatogram yang sesuai dengan jumlah zat tunggal yang keluar dari lajur.
Rujukan
- Bhanot, D. (2013). Bagaimana Membaca Chromatogram? Dipulihkan dari: lab-training.com
- Carey, FA (2006). Kimia Organik Edisi Keenam. Rumah Penerbitan Mc Graw Hill
- Kromatografi Hari Ini. (2014). Apa itu Chromatogram? Dipulihkan dari: chromatographytoday.com
- Mathias, J. (2018). Panduan Pemula: Cara Mentafsirkan Hasil Spektrometri Jisim Kromatografi Kromatografi Gas. Dipulihkan dari: innovatechlabs.com
- Persatuan Kromatografi Sepanyol dan Teknik Berkaitan. (2014). Kromatogram. Dipulihkan dari: secyta.es
- Wikipedia. (2019). Kromatografi Kertas. Dipulihkan dari: wikipedia.org
