- Jenis kultur bakteria
- Kultur bakteria polimikrob
- Budaya bakteria tulen
- Budaya bakteria bercampur
- Ciri-ciri kultur bakteria
- Contohnya tanah jajahan mengikut ukurannya
- Contoh tanah jajahan mengikut penampilannya
- Contohnya tanah jajahan mengikut teksturnya
- Contoh tanah jajahan mengikut bentuknya
- Contoh tanah jajahan mengikut sempadannya
- Contoh tanah jajahan mengikut warnanya
- Kaedah kultur bakteria
- Budaya bakteria aerobik atau anaerob fakultatif
- Budaya bakteria anaerobik
- Budaya bakteria pada mikroerofilia
- Bahan dan keperluan
- bahan
- Keperluan untuk melakukan kultur bakteria
- Nutrien
- Kepekatan ion hidrogen (pH)
- Suhu
- Keperluan oksigen
- Media budaya
- Koleksi kultur bakteria
- Rujukan
A budaya bakteria adalah hasil daripada pembenihan mikroorganisma ini di media berkhasiat, bagi membolehkan mereka untuk menghasilkan semula, menyebabkan kemunculan koloni bakteria dalam media pepejal dan keadaan mendung dalam media cecair.
Kaedah menyemai sangat penting untuk dapat mengedarkan inokulum sedemikian rupa sehingga bakteria yang ada tersebar dan dapat mengembangkan koloni yang terasing dengan betul.

Pelbagai tanaman yang ditanam oleh penulis di Makmal Bakteriologi Bangunan Sains Bioperubatan dan Teknologi, Universiti Carabobo. Sumber: komposisi gambar yang diambil oleh pengarang MSc. Marielsa Gil.
Koloni yang diperoleh dalam medium kultur pepejal adalah akibat percambahan mikroorganisma yang ditanam. Setiap koloni bermula dari satu bakteria, yang dapat membiak secara eksponensial untuk membentuk populasi yang kelihatan secara makroskopik.
Perkara yang sama berlaku pada media kultur cecair tetapi dalam hal ini pertumbuhan bakteria diperhatikan oleh kekeruhan.
Pertumbuhan bakteria adalah mungkin apabila medium kultur yang dipilih memenuhi syarat pemakanan dan pH yang diperlukan untuk pengembangan bakteria tertentu. Di samping itu, perlu untuk mengawal pemboleh ubah lain, seperti suhu, masa inkubasi, kepekatan oksigen, CO 2 , antara lain.
Tidak semua populasi bakteria memerlukan keperluan yang sama, walaupun ada yang umum bagi hampir semua orang, seperti media yang mengandungi peptone, juga benar bahawa terdapat mikroorganisma yang lebih menuntut yang memerlukan bahan-bahan tertentu yang disebut faktor pertumbuhan.
Sebagai contoh, dapat disebut bahawa sebilangan Haemophilus memerlukan kehadiran faktor X (hemin) dan faktor V (NAD) untuk berkembang.
Jenis kultur bakteria
Budaya bakteria boleh bersifat polimikrob, tulen atau bercampur.
Kultur bakteria polimikrob
Budaya polimikrob adalah budaya yang berasal dari penaburan sampel yang diperoleh dari tempat yang mempunyai mikrobiota normal, di mana patogen tertentu juga dapat dijumpai.
Contoh: semasa mengembangkan kultur swab kerongkong, patogen seperti Streptococcus pyogenes mungkin dijumpai, tetapi akan disertai oleh mikrobiota yang biasa di kawasan ini.
Dalam kes ini, peregangan yang baik adalah mustahak untuk memungkinkan pertumbuhan pelbagai jenis bakteria yang ada secara terpisah.
Koloni yang mempunyai ciri-ciri yang sesuai dengan strain Streptococcus pyogenes akan disentuh dengan hati-hati dengan gelung platinum dan kemudian ditanam dalam medium kultur dara dan dengan demikian memperoleh budaya murni mikroorganisma tersebut.
Dari budaya murni ini, semua ujian yang diperlukan untuk mengenal pasti bakteria dapat dijalankan.
Budaya bakteria tulen
Untuk mengenal pasti mikroorganisma dengan berkesan, seseorang mesti bekerja dari budaya murni.
Budaya murni dapat diperoleh seperti dalam contoh sebelumnya dengan menanam kembali koloni terpencil dari budaya polimikrob, atau ketika sampel ditaburkan yang berasal dari tempat yang biasanya steril dan di sini hanya ada satu patogen (pertumbuhan satu jenis bakteria). Contoh: apabila CSF diturunkan dari pesakit dengan meningitis bakteria.
Cara lain adalah ketika beralih dari budaya murni lama untuk mendapatkan budaya murni yang diperbaharui.
Budaya bakteria bercampur
Budaya ini terdiri dari campuran mikroorganisma, kerana ia berlaku di alam semula jadi. Dalam beberapa proses industri, penggunaan budaya campuran mudah dilakukan.
Ia dapat diperoleh melalui penyatuan beberapa budaya murni, kerana ini memungkinkan kajian hubungan antara bakteria.
Mereka berguna, misalnya, dalam penurunan xenobiotik dalam air sisa industri, kerana ia bertindak sebagai agen biodegradasi.
Ciri-ciri kultur bakteria
Ciri morfologi koloni yang diperoleh dalam kultur bakteria dapat sangat bervariasi.
Koloni boleh menjadi sangat kecil, sederhana, atau besar dan mungkin kelihatan kering atau mukoid, berkilat atau kusam. Bergantung pada teksturnya, ia boleh berbeza antara halus dan kasar dan, bergantung pada bentuknya, bentuknya boleh berbentuk bulat, rata, cembung.
Bergantung pada warnanya, warnanya: tidak berwarna, putih, kuning, merah jambu, fuchsia, merah, oren, kuning air, kelabu, kehijauan, coklat, hitam atau dengan kilauan logam, bergantung pada bakteria yang terlibat dan media kultur yang digunakan.
Sempadan koloni boleh menjadi biasa atau tidak teratur. Sebaliknya, yang lain dapat menampilkan filem seragam yang diedarkan di hampir keseluruhan media yang disebut "mengerumuni". Ini adalah ciri Proteus sp.
Beberapa kultur bakteria mengeluarkan bau yang cukup khas dari spesies yang terlibat. Sebagai contoh, budaya Pseudomonas aeruginosa mempunyai bau buah yang khas, sedangkan genus Proteus mempunyai bau busuk yang khas.
Contohnya tanah jajahan mengikut ukurannya
Sangat kecil: Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.
Kecil: Streptococcus sp, Enterococcus sp.
Sederhana: Enterobacteriaceae keluarga
Besar: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.
Contoh tanah jajahan mengikut penampilannya
Kering: Lactobacillus confusus.
Mucoids: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.
Cemerlang: Klebsiella pneumoniae.
Buram: Enterococcus faecalis, beberapa jenis Neisseria gonorrhoeae.
Contohnya tanah jajahan mengikut teksturnya
Jajahan halus: Micrococcus luteus
Koloni kasar: Sarcina ventriculi pada agar nutrien.
Contoh tanah jajahan mengikut bentuknya
Pekeliling: Listeria murrayi dan Micrococcus luteus pada agar nutrien.
Rata: Staphylococcus equorum pada agar nutrien.
Cembung: Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.
Contoh tanah jajahan mengikut sempadannya
Tepi bulat: Staphylococcus aureus, Escherichia coli.
Sempadan tidak teratur: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.
Tepi bergetar: Bacillus sp.
Contoh tanah jajahan mengikut warnanya
Telus atau tidak berwarna: Shigella sp pada agar XLD.
Putih: Staphylococcus hominis pada agar darah.
Beige: Bacillus sphaericus dan Lactobacillus confusus pada agar nutrien.
Kuning: Staphylococcus aureus dan Elizabethkingia meningoseptica pada agar darah, Pediococcus sp, Staphylococcus lentus pada agar nutrien,
Pink: Escherichia coli pada agar XLD, Micrococcus roseus pada agar nutrien.
Fuchsia: Escherichia coli pada agar-agar Mac Conkey.
Violet: Chromobacterium violaceum.
Kemerahan: Serratia marcescens pada suhu bilik pada agar nutrien.
Oren: Kurthia zopfii pada agar nutrien.
Kelabu: Sporosarcina ureae dalam agar-agar ekstrak tanah.
Kehijauan: Pseudomonas aeruginosa pada agar BHI.
Coklat: Enterococcus sp pada agar esculin hempedu.
Hitam: Salmonella enteritidis pada agar SS.
Dengan kilauan logam: Escherichia coli pada agar Endo.
Kaedah kultur bakteria
Budaya bakteria aerobik atau anaerob fakultatif
Ia adalah kaedah penanaman yang paling banyak digunakan. Ini disebabkan oleh fakta bahawa, pada mulanya, kebanyakan bakteria patogen bagi manusia adalah anaerobik aerobik atau fakultatif; dan kedua, jauh lebih murah dan lebih mudah daripada budaya anaerobik. Contoh: Mycoplasma pneumoniae dan Escherichia coli masing-masing.
Budaya bakteria anaerobik
Jenis kultur ini memerlukan penekanan oksigen yang lengkap. Media kultur untuk bakteria anaerob biasanya mengandungi bahan pengurangan, seperti: asid askorbik, thioglycollate, sistein atau sulfur untuk menghilangkan kesan toksik oksigen yang terkandung di udara.
Beberapa mengandungi petunjuk seperti resazurin yang berwarna biru di hadapan oksigen dan tidak berwarna pada anaerobiosis. Contoh: Clostridium tetani.
Budaya bakteria pada mikroerofilia
Plat kultur diletakkan di tudung microaerophilic dengan lilin yang menyala, ditutup. Lilin menghabiskan oksigen dan padam. Dalam keadaan ini, beberapa bakteria tumbuh, seperti Streptococcus sp.
Bahan dan keperluan
bahan
Bahan yang diperlukan untuk melakukan kultur bakteria adalah: Piring atau tiub Petri dengan media kultur atau kaldu, gelung platinum, sampel, pembakar atau oven Bunsen.
Keperluan untuk melakukan kultur bakteria
Budaya bakteria memerlukan banyak unsur yang mesti diambil kira, seperti nutrien dalam medium, pH, suhu, kepekatan oksigen, CO2, kelembapan, antara lain.
Nutrien
Budaya bakteria memerlukan media kultur yang mengandungi unsur makro dan elemen mikro. Di antara unsur-unsur makro, bahan organik seperti peptone, asid amino, karbohidrat sebagai sumber karbon dan nitrogen dapat disebutkan.
Antara unsur mikro adalah bahan bukan organik atau unsur surih mangan, zink, nikel, boron, klorin, selenium, silikon, kobalt, tembaga, antara lain.
Kepekatan ion hidrogen (pH)
Kepekatan ion hidrogen (H + ) dan ion hidroksil (OH - ) dalam medium di mana kultur akan berkembang sangat penting, kerana ini menentukan pH.
PH yang paling biasa digunakan adalah neutral (pH = 7.0), namun mungkin ada media di mana pH berasid atau alkali sesuai, misalnya jika anda ingin mengasingkan bakteria acidophilic atau alkaliphile.
Suhu
Suhu adalah faktor yang sangat penting yang mempengaruhi pertumbuhan kultur bakteria. Bakteria boleh menjadi psikofilik (tumbuh pada suhu <20 ° C, mesofilik (antara 20 ° C dan 42 ° C), termofilik (40 ° C hingga 70 ° C), hipertermofilik (70 ° C - 105 ° C).
Keperluan oksigen
Aerobik: mereka tumbuh dengan adanya oksigen.
Mikroerofilik: mereka tumbuh di hadapan 5-10% CO 2.
Anaerob yang ketat: tumbuh dengan ketiadaan oksigen.
Anaerob fakultatif: tumbuh di hadapan oksigen atau tanpanya.
Aerotolerant: mereka tumbuh dengan baik tanpa oksigen dan bertolak ansur dengan sedikit oksigen.
Media budaya
Media kultur adalah persediaan pemakanan khas yang disediakan di makmal untuk mendapatkan pertumbuhan atau pembiakan mikroba. Media ini berbeza dalam konsistensi, komposisi, dan fungsi. Setiap makmal akan menyediakan jenis medium kultur yang sesuai dengan keperluan mereka.
Koleksi kultur bakteria
Terdapat institusi atau organisasi yang dikhaskan untuk pengumpulan, pencirian, pemeliharaan dan pengedaran strain bakteria yang penting dari segi klinikal, persekitaran atau industri.
Strain ini digunakan untuk kerja penyelidikan dan menjalankan kawalan kualiti pada media budaya.
Contoh: strain Koleksi Budaya Jenis Amerika, Pusat Pengumpulan Mikroorganisma Venezuela (CVCM) dan strain Institut Kebersihan, Epidemiologi dan Mikrobiologi Negara Cuba (INHEM), antara lain.
Rujukan
- Benavides G, Hermida A. Pengasingan dan pengenalan flora bakteria asli dari tanah Cruz Verde dan Guasca páramos. (Cundinamarca). 2008. Bogotá. Terdapat di: javeriana.edu.co/biblos
- Hans S. Mikrobiologi Umum. Edisi Omega. 1991. Barcelona, Sepanyol. Terdapat dalam: biolprocariotas.files
- Weng Z, Junco R, Díaz R. Koleksi budaya mikrob: Catatan mengenai perkembangannya. Rev Cubana Hig Epidemiol, 2003; 41 (1). Terdapat di: scielo.sld.cu/scielo.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologi. Edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
