UJIAN BIOKIMIA: JENIS, KEPENTINGAN DAN KEPENTINGANNYA - BIOLOGI - 2026

The ujian biokimia dalam bidang mikrobiologi adalah satu set bahan kimia ujian dibawa ke mikroorganisma hadir dalam sampel untuk mengenal pasti mereka ; Mikroorganisma ini biasanya bakteria. Terdapat sebilangan besar ujian biokimia yang tersedia untuk ahli mikrobiologi.

Walau bagaimanapun, pilihan ujian ini didasarkan pada penemuan awal, seperti corak noda Gram dan ciri pertumbuhan, yang membolehkan bakteria ditugaskan ke kategori tertentu. Ujian biokimia terutamanya berdasarkan sifat metabolik setiap jenis bakteria.

Tidak semua bakteria mempunyai sifat yang sama, jadi disiasat apakah mereka memiliki enzim tertentu dengan menambahkan substrat dan menunggu reaksi terjadi. Biasanya penentuan ini diberikan oleh perubahan warna atau pH pada medium kultur.

Kurang daripada 15 ujian biokimia sering diperlukan untuk mengenal pasti bakteria hingga tahap spesies. Melakukan lebih banyak ujian biokimia dapat meningkatkan keyakinan terhadap pengenalan diri.

Sebilangan besar ujian biokimia ini dilakukan pada serum atau plasma darah. Walau bagaimanapun, ia juga boleh dilakukan pada rembesan biologi lain seperti: air kencing, cecair serebrospinal, cecair pleura dan tinja, antara lain.

Pengelasan

Ujian biokimia boleh dikelaskan kepada 3 kumpulan:

Sejagat

Mereka adalah ujian yang dapat dilakukan pada sampel apa pun dan yang memberi petunjuk kepada ahli mikrobiologi mengenai ujian biokimia berikut yang mesti dilakukan untuk mendapatkan pengenalan yang dapat dipercayai.

Contohnya

Ujian katalase dan oksidase.

Pembezaan

Mereka adalah ujian yang dilakukan untuk mengenal pasti mikroorganisma yang terdapat dalam sampel hingga ke tahap spesies.

Pengenalan dibuat berdasarkan hasil gabungan ujian, kerana keputusan individu tidak cukup informatif untuk membuat pengenalan.

Contohnya

Ujian IMViC dan ujian penggunaan gula.

Khusus

Mereka adalah ujian khusus untuk sekumpulan spesies tertentu atau untuk menaipkan spesies. Ujian ini secara amnya dilakukan untuk mengesahkan atau mengenal pasti di peringkat subspesies. Ujian individu adalah maklumat dalam diri mereka.

Contohnya

Ujian γ-Glutamyl aminopeptidase.

Jenis ujian biokimia

Ujian pemangkin

Uji katalase adalah ujian untuk menunjukkan kehadiran enzim katalase dengan memecah hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Sebilangan kecil bakteria ditambahkan ke setetes hidrogen peroksida (3%) pada slaid.

Ujian katalase adalah ujian sederhana yang digunakan oleh ahli mikrobiologi untuk membantu mengenal pasti spesies bakteria dan untuk menentukan kemampuan beberapa mikroba memecah hidrogen peroksida dengan menghasilkan enzim katalase.

Sekiranya gelembung oksigen diperhatikan, ini bermakna bakteria mempunyai enzim katalase, kerana ia memangkin penguraian hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Organisme ini kemudian dikatakan positif katalase (contohnya Staphylococcus aureus).

Ujian oksidase

Ujian ini digunakan untuk mengenal pasti mikroorganisma yang mengandungi enzim sitokrom oksidase (penting dalam rantai pengangkutan elektron). Biasanya digunakan untuk membezakan antara keluarga Enterobacteriaceae dan Pseudomadaceae.

Sitokrom oksidase memindahkan elektron dari rantai pengangkutan elektron ke oksigen (akseptor elektron akhir) dan mengurangkannya ke air. Molekul penderma dan akseptor elektron buatan disediakan dalam ujian oksidase.

Apabila penderma elektron teroksidasi oleh tindakan sitokrom oksidase, medium bertukar menjadi ungu gelap dan dianggap sebagai hasil positif. Mikroorganisma Pseudomonas aeruginosa adalah contoh bakteria positif oksidase.

Ujian Mannitol Agar (MSA) Asin

Jenis ujian ini bersifat selektif dan berbeza. MSA akan memilih organisma yang mampu hidup di persekitaran dengan kepekatan garam tinggi, seperti spesies Staphylococcus berbeza dengan spesies Streptococcus, yang pertumbuhannya dihambat dalam keadaan ini.

Komponen pembezaan dalam ujian ini adalah gula manitol. Organisma yang mampu menggunakan manitol sebagai sumber makanan akan menghasilkan produk sampingan fermentasi, yang bersifat berasid dan dengan demikian menurunkan pH medium.

Keasidan medium menyebabkan penunjuk pH, fenol merah, menjadi kuning. Contoh spesies bakteria yang dapat dibezakan dengan kaedah ini adalah: Staphylococcus aureus (positif kerana ia fermentasi manitol) dan Staphylococcus epidermidis (negatif kerana tidak fermentasi manitol).

Ujian Coagulase

Coagulase adalah enzim yang membantu pembekuan plasma darah. Ujian ini dilakukan pada spesies bakteria Gram positif dan katalase positif untuk mengenal pasti Staphylococcus aureus (koagulase positif). Sebenarnya, koagulase adalah faktor virulensi spesies bakteria ini.

Pembentukan bekuan di sekitar jangkitan yang disebabkan oleh bakteria ini mungkin melindunginya dari fagositosis. Ujian ini sangat berguna apabila anda ingin membezakan Staphylococcus aureus dari spesies Staphylococcus lain yang negatif koagulase.

Ujian urease

Ujian ini digunakan untuk mengenal pasti bakteria yang mampu menghidrolisis urea, menggunakan enzim urease. Ia biasanya digunakan untuk membezakan genus Proteus dari bakteria enterik yang lain.

Hidrolisis urea menghasilkan ammonia sebagai salah satu produknya. Pangkalan lemah ini meningkatkan pH medium di atas 8.4 dan penunjuk pH (fenol merah) berubah dari kuning ke merah jambu. Contoh bakteria positif urease adalah Proteus mirabilis.

Untuk apa ujian biokimia?

Ujian biokimia dalam mikrobiologi digunakan untuk mendiagnosis penyakit yang disebabkan oleh mikrob dan untuk memantau rawatan yang diberikan untuk memerangi mereka. Selain itu, mereka digunakan untuk pemeriksaan penyakit berjangkit dan prognosisnya.

Pengenalpastian biokimia mikroorganisma menawarkan idea tentang apa yang mampu dilakukan oleh mikroorganisma ini, yang mungkin merupakan diskriminasi strain yang berlainan dari spesies yang sama dengan profil biokimia tertentu.

Perbezaan dalam aktiviti enzim tertentu memberitahu ekologi, fisiologi atau habitat semula jadi mikroorganisma, yang dalam beberapa kes dapat dianggap sebagai maklumat penting.

Kepentingan

Perbezaan struktur dalam bentuk, ukuran, dan susunan bakteria tidak banyak membantu dalam proses identifikasi, kerana terdapat banyak spesies bakteria yang serupa bentuk, ukuran, dan susunannya.

Atas sebab ini, pengenalpastian bakteria akhirnya berdasarkan terutamanya pada perbezaan aktiviti biokimia mereka.

Setiap spesies bakteria mempunyai kumpulan aktiviti metabolik yang jelas berbeza dari semua spesies lain. "Cap jari" biokimia ini adalah sifat yang dikawal oleh enzim bakteria.

Oleh itu, ujian biokimia adalah penting kerana ia membantu penyelidik untuk mengenal pasti patogen yang terdapat dalam sampel dan, dengan cara ini, dapat mengesyorkan rawatan yang sesuai kepada pesakit.

Rujukan

1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Biokimia Klinikal (edisi ke-8). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, PH, & Cowan, ST (1952). Kaedah biokimia untuk bakteriologi. Jurnal Mikrobiologi Umum, 6 (1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Biokimia Klinikal (edisi ke-5). Sains Kesihatan Elsevier.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Buku Panduan Praktikal Mikrobiologi (edisi ke-2). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Kaedah Makmal dalam Mikrobiologi Makanan (edisi ke-3). Akhbar Akademik.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Mikrobiologi Praktikal. BI Publications Pvt Ltd.