UJIAN SILANG: UNTUK APA, TEKNIK, RASIONAL, FASA - UBAT - 2025

The Crossmatch beberapa kajian makmal dijalankan untuk menentukan sama ada produk darah dari penderma (terutamanya darah keseluruhan dan globular dibungkus) serasi dengan darah penerima.

Ini adalah ujian tambahan untuk keserasian ABO dan faktor Rh. Sebab untuk melakukan crossmatching adalah kadang-kadang dua individu (penerima penderma) mungkin mempunyai kumpulan ABO dan Rh yang sama tetapi darah mereka masih tidak serasi.

Sumber: unsplash.com

Ketidaksesuaian tersebut disebabkan adanya antibodi terhadap rangkaian protein sel darah merah yang dikenali sebagai antigen kecil. Antigen ini tidak diuji secara rutin kerana untuk kumpulan darah (ABO) dan faktor Rh.

Ini kerana antigen kecil lebih jarang dan mempunyai ungkapan yang berubah-ubah pada setiap individu, oleh itu adalah mustahil untuk mengelompokkannya ke dalam kategori kerana ia dilakukan dengan faktor kumpulan dan Rh.

Sebaliknya, sel-sel merah penderma dicampurkan dengan serum pesakit (ujian perlawanan utama) dan sel-sel merah pesakit dengan serum penderma (ujian perlawanan kecil) untuk mengesan kehadiran reaksi antigen-antibodi.

Apabila terdapat antibodi terhadap antigen kecil, baik dalam serum pesakit atau penderma, ujian tersebut dikatakan positif, jadi dalam kebanyakan kes unit darah tertentu tidak dapat ditransfusikan.

Kumpulan ABO

Untuk memahami sepenuhnya tindak balas silang, pertama anda perlu mengetahui asas-asas kumpulan darah.

Dalam pengertian ini, perkara yang paling penting adalah mengetahui bahawa darah dapat dikelaskan kepada empat kumpulan: A, B, AB dan O.

Setiap kumpulan ini menyatakan pada permukaan sel darah merah protein tertentu (antigen), yang dikenal pasti sebagai unsur asing oleh antibodi reseptor berpotensi dari kumpulan yang berbeza.

Perkara yang paling mencolok mengenai reaksi antigen-antibodi dalam pencocokan darah adalah bahawa tidak ada pendedahan sebelumnya kepada antigen yang diperlukan agar antibodi wujud. Ini dikenali sebagai antibodi semula jadi.

Antibodi semula jadi

Secara amnya, agar antibodi wujud di dalam badan seseorang, sel darah putih individu tersebut sebelum ini terdedah kepada antigen.

Ini bermaksud bahawa dalam hubungan pertama antara antigen asing dan organisma, tidak ada antibodi, kerana ini dihasilkan kemudian, setelah kontak awal. Oleh itu, mustahil sistem kekebalan tubuh mempunyai antibodi terhadap virus tertentu, jika tidak pernah terdedah kepadanya pada masa lalu.

Satu-satunya pengecualian di atas adalah antigen anti-AB. Dalam kes ini, orang tersebut mempunyai antibodi terhadap antigen yang tidak dimiliki sel darah merahnya, walaupun mereka tidak pernah bersentuhan dengan sel darah merah orang lain. Ini dikenali sebagai antibodi semula jadi.

Antigen dan antibodi yang berkaitan dengan kumpulan darah

Kumpulan darah ditentukan dalam kes sistem ABO dengan adanya antigen spesifik (A atau B) pada membran sel darah merah dan, sebaliknya, antibodi terhadap antigen yang tidak ada pada membran eritrosit.

Oleh itu, seseorang dengan kumpulan darah A menyatakan antigen A pada permukaan sel darah merahnya, sementara terdapat antibodi anti-B dalam serum.

Sebaliknya, pada pesakit kumpulan B antigen B dijumpai sementara antibodi anti-A.

Walau bagaimanapun, pesakit dengan darah AB mempunyai kedua-dua antigen A dan B. Oleh itu, tidak ada antibodi kerana melakukannya akan memusnahkan sel darah merah orang itu.

Sebaliknya berlaku pada kumpulan O, di mana membran eritrosit tidak menunjukkan kedua-dua antigen (baik A maupun B), sementara di dalam serum terdapat antibodi anti-A dan anti-B.

Ketidaksesuaian kumpulan ABO

Dari perkara di atas, keserasian kumpulan darah ABO dapat disimpulkan dengan mudah, kerana mengetahui antigen membran eritrosit secara automatik mengetahui antibodi dalam serum. Oleh itu:

- Darah A sesuai dengan kumpulan A dan kumpulan O.

- Kumpulan darah B sesuai dengan darah B dan O.

- Orang dengan kumpulan O hanya dapat menerima darah O (kerana mereka mempunyai antibodi anti-A dan anti-B), walaupun darah mereka diterima oleh semua kumpulan lain tanpa masalah kerana kekurangan antigen.

- Akhirnya. mereka yang mempunyai kumpulan darah AB dapat menerima darah dari semua kumpulan lain (A, B, O dan tentu saja AB), kerana mereka tidak mempunyai antibodi terhadap antigen mana pun. Namun, hanya orang dalam kumpulan AB yang dapat menerima darah AB, kerana semua kumpulan lain mempunyai antibodi yang akan memusnahkan sel darah merah ini.

Antigen kecil

Seperti kumpulan ABO, serangkaian protein dapat dijumpai di permukaan eritrosit yang berfungsi sebagai antigen dengan cara yang sama seperti antigen kumpulan ABO.

Walau bagaimanapun, antigen ini tidak terdapat pada semua individu. Gabungan mereka heterogen dan penembusan (tahap ekspresi protein) berubah-ubah, oleh itu pengkelasan ke dalam kumpulan seperti yang wujud untuk ABO dan Rh adalah mustahil. Di sinilah namanya berasal dari "antigen kecil", juga dikenal sebagai "antigen kejadian rendah."

Walaupun tidak kerap, mungkin ada antibodi semula jadi terhadap antigen kecil. Antaranya yang paling biasa adalah Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb dan Kidd. Kesemuanya bertanggungjawab terhadap reaksi hemolitik dan pasca transfusi yang sangat serius.

Di samping itu, mungkin terdapat kes pemekaan terhadap antigen kecil oleh kontak sebelumnya, sama ada dengan protein antigenik yang disebabkan oleh pemindahan sebelumnya atau disebabkan oleh kekebalan silang.

Kekebalan silang

Dikatakan bahawa terdapat kekebalan silang apabila dua antigen dari dua sumber yang berlainan (misalnya sel darah merah dan bakteria) sangat serupa, sehingga antibodi terhadap salah satu protein antigenik ini juga bertindak balas dengan yang lain kerana hampir sama .

Untuk memahami perkara ini dengan lebih baik, ambil contoh hipotesis sebelumnya (antigen dari sel darah merah dan bakteria). Tidak ada antibodi semula jadi, tetapi jika seseorang terkena bakteria, mereka akan menghasilkan antibodi terhadapnya.

Antibodi seperti itu kemudiannya akan bertindak balas terhadap sel darah merah jika antigennya sangat serupa dengan bakteria yang menyebabkan antibodi terbentuk.

Sekiranya ini berlaku, sel darah merah dengan protein antigenik tertentu tidak dapat diberikan kepada orang yang mempunyai antibodi, kerana akan ada penolakan. Di sinilah pentingnya tindak balas silang.

Untuk apa melakukan crossmatching?

Oleh kerana mustahil untuk mengelompokkan darah individu yang berlainan berdasarkan antigen kecil, satu-satunya cara untuk mengetahui sama ada terdapat antibodi terhadap antigen kecil sel darah merah orang lain dalam darah seseorang adalah melalui crossmatching. .

Dalam kes-kes di mana terdapat antibodi, reaksi hemolisis atau aglutinasi dipicu, itulah sebabnya disimpulkan bahawa reaksi itu positif; iaitu, ada antibodi terhadap antigen kecil (walaupun tidak diketahui dengan tepat yang mana). Jika tidak, ujian itu negatif.

Asas

Crossmatch berdasarkan reaksi antigen-antibodi. Oleh itu, dengan mereka adalah mungkin untuk mengesan jika ada antibodi dalam serum penerima terhadap antigen sel darah merah penderma (atau sebaliknya), yang menimbulkan reaksi antigen-antibodi.

Sekiranya tidak ada antibodi, reaksi tidak berlaku dan ujian dilaporkan negatif. Sebaliknya, jika tindak balas positif (terdapat hemolisis atau penyatuan semasa ujian) dapat disimpulkan bahawa antibodi itu ada.

Dalam pengertian ini, penting untuk diperhatikan bahawa mungkin ada antibodi terhadap sel darah merah di kedua-dua serum penderma dan penerima. Inilah sebabnya mengapa terdapat dua jenis tindak balas silang.

Jenis tindak balas silang

Antibodi terhadap eritrosit penderma mungkin terdapat di dalam serum pesakit; tetapi sebaliknya juga boleh berlaku, iaitu antibodi dalam serum penderma terhadap sel darah merah pesakit.

Itulah sebabnya terdapat dua jenis crossmatch:

- Pasukan silang utama.

- Perlawanan kecil.

Kedua-dua jenis dilakukan secara rutin di bank darah sebelum melakukan pemindahan produk darah, kerana jika ada ujian yang positif terdapat risiko reaksi transfusi yang tinggi yang dapat membahayakan nyawa pesakit.

Jambatan silang utama

Ujian ini menilai sama ada serum penerima mengandungi antibodi terhadap sel darah merah penderma.

Sekiranya ini berlaku, produk darah tidak dapat diberikan, kerana sejumlah besar antibodi yang terdapat di dalam plasma pesakit akan memusnahkan sel darah merah penderma dengan cepat, sehingga menimbulkan reaksi bencana pada tubuh penerima dalam prosesnya. Reaksi ini sangat teruk sehingga boleh mengancam nyawa.

Pelbagai rentak kecil

Dalam kes ini, ditentukan sama ada terdapat antibodi terhadap sel darah merah penerima dalam serum penderma.

Sekiranya demikian, antibodi akan mula memusnahkan eritrosit penerima. Walau bagaimanapun, memandangkan jumlah antibodi terhad, reaksi kurang sengit; walaupun masih berbahaya.

Fasa

Crossmatch utama dan kecil dibahagikan kepada tiga fasa:

- Saline.

- Termal atau pengeraman.

- Coombs.

Pada fasa pertama sel darah merah dan serum dicampurkan dalam larutan garam. Selepas itu, albumin ditambahkan, dan sampel diinkubasi pada suhu 37ºC selama 30 minit untuk akhirnya meneruskan fasa coombs.

Teknik

Teknik crossmatch agak mudah, kerana melibatkan penambahan sel darah merah penderma ke serum pesakit (crossmatch utama) serta eritrosit penerima ke serum penderma (crossmatch kecil).

Untuk mendorong reaksi antigen-antibodi dalam waktu yang relatif singkat, satu siri langkah standard mesti diikuti. Langkah-langkah ini diringkaskan dengan cara yang dipermudah di bawah.

Penting untuk diperhatikan bahawa bahagian seterusnya menerangkan ujian keserasian utama, walaupun langkahnya sama untuk ujian keserasian kecil, tetapi menukar asal sel darah merah dan serum.

Fasa masin

- Tambahkan ke tabung uji 2 tetes serum dari penerima (dari penderma jika itu adalah crossmatch kecil).

- Ambil sampel sel darah merah dari penderma (dari penerima jika itu adalah crossmatch kecil).

- Basuh dan sentrifus sel darah merah.

- Masukkan semula larutan antara 3% hingga 5%.

- Letakkan setetes larutan ini ke dalam tiub yang mengandungi serum penerima.

- Campurkan dengan lembut.

- Sentrifuge.

- Baca hasilnya di lampu paparan.

Fasa terma

- Tambahkan 2 tetes albumin 22% ke dalam tiub di mana fasa garam selesai.

- Inkubkan pada suhu 37ºC selama 30 minit.

- Sentrifus selama 15 saat.

- Baca hasilnya di lampu paparan.

Fasa Coombs

- Keluarkan sel dari tiub dan basuh dengan larutan masin.

- Menghilangkan supernatan.

- Tambahkan dua tetes reagen Coombs.

- Campurkan dengan lembut.

- Sentrifus selama 15 hingga 30 saat.

- Masukkan semula sel dan buat penilaian pada lampu tontonan untuk pengagregatan atau hemolisis.

Sekiranya terdapat aglutinasi atau hemolisis pada salah satu fasa, hasilnya dianggap positif.

Rujukan

1. Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., & Dennison, AR (2013). Polisi transfusi darah dalam pembedahan umum elektif: bagaimana mengoptimumkan nisbah cross-match-to-transfusion. Perubatan Transfusi dan Hemoterapi, 40 (1), 27-31.
2. Silvergleid, AJ, Wells, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, & Grumet, FC (1978). Ujian keserasian menggunakan sel darah merah berlabel 51 Kromium pada pesakit positif crossmatch. Transfusi, 18 (1), 8-14.
3. Kulkarni, N., Ali, M., Haray, PN, Joseph, A., & Masoud, A. (2006). Sistem Pencocokan Silang Elektronik. Adakah Pencocokan Darah Pra-Operatif Rutin untuk Reseksi Kolorektal Diperlukan Lagi ?. Endoskopi, 38 (11), Poster_50.
4. Heal, JM, Blumberg, N., & Masel, D. (1987). Penilaian pemadanan silang, HLA, dan pemadanan ABO untuk pemindahan platelet ke pesakit refraktori. Darah, 70 (1), 23-30.
5. Arslan, Ö. (2006). Pemadanan silang elektronik. Ulasan perubatan Transfusi, 20 (1), 75-79.
6. Wu, KK, Hoak, JC, Koepke, JA, & Thompson, JS (1977). Pemilihan penderma platelet serasi: penilaian prospektif tiga teknik pemadanan silang. Transfusi, 17 (6), 638-643.
7. Schonewille, H., Zijl, AMV, & Wijermans, PW (2003). Kepentingan antibodi terhadap antigen RBC insiden rendah dalam pemadanan silang yang lengkap dan disingkat. Transfusi, 43 (7), 939-944.