- Pewarna yang digunakan dalam pewarnaan sederhana
- 6 langkah untuk pewarnaan sederhana
- Langkah 1
- Pemerhatian
- Langkah 2
- Pemerhatian
- Langkah 3
- Langkah 4
- Pemerhatian
- Langkah 5
- Rujukan
Yang mengotorkan tunggal adalah cara yang cepat prosedur pewarnaan dan mudah di mana pewarna tunggal digunakan, jadi ia dipanggil mudah. Ia digunakan terutamanya untuk menentukan morfologi dan organisasi sel yang terdapat dalam sampel.
Sel secara semula jadi tidak berwarna, jadi perlu menjadikannya kelihatan dalam beberapa cara apabila dilihat di bawah mikroskop.

Sel pipi manusia diwarnai dengan pewarnaan biru metilena sederhana.
Penting untuk diperhatikan bahawa pewarna yang digunakan dalam pewarnaan sederhana mestilah asas dengan cas positif (kationik), sehingga dapat secara spontan mengikat pada dinding sel dan sitoplasma.
Struktur selular ini bercas negatif. Inilah sebabnya mengapa pewarna bermuatan positif tertarik pada sel dan mengikatnya secara spontan. Oleh itu, semua sel yang terdapat dalam sampel cepat diwarnai.
Pewarna yang digunakan dalam pewarnaan sederhana
Terdapat beberapa noda asas yang boleh digunakan di makmal mikrobiologi. Yang paling banyak digunakan adalah:
- Metilena biru.
- Violet kristal.
- Hijau malachite.
- fuchsin asas.
Semua pewarna ini berfungsi dengan baik pada bakteria kerana ia mempunyai ion warna (kationik) positif (kromofor).
Masa pewarnaan bagi kebanyakan noda ini agak singkat. Mereka biasanya berkisar antara 30 saat hingga 2 minit, bergantung pada pertalian pewarna.
Penting untuk diingat bahawa sebelum mewarnai sampel dengan pewarnaan sederhana, ia mesti dilanjutkan dan dipasang ke slaid kaca (slaid); sampel yang diperpanjang dan tetap disebut smear.
6 langkah untuk pewarnaan sederhana
Langkah 1
Letakkan slaid di rak pewarnaan dan sapukan noda yang diingini. Biarkan masa yang sesuai bertindak.
Pewarnaan sederhana biasanya memerlukan beberapa saat hingga beberapa minit, bergantung pada noda yang digunakan.
Pemerhatian
Dalam langkah ini adalah penting untuk tidak melebihi masa yang disarankan untuk pewarna yang digunakan, kerana kristal dapat terbentuk di lembaran, menghasilkan apa yang dikenali sebagai "artifak" yang memutarbelitkan morfologi sel.
Langkah 2
Basuh smear dengan berhati-hati dari slaid dengan air suling dari sebotol, atau juga dengan air paip yang mengalir perlahan, sehingga limpasan menjadi jelas. Ini biasanya mengambil masa 5-10 saat.
Pemerhatian
Jangan menggunakan aliran air secara langsung pada smear, untuk mengelakkan kekuatan yang sama merosakkan sampel.
Sekiranya anda tidak mempunyai air suling, anda boleh menggunakan air paip tanpa masalah kerana ia tidak akan mempengaruhi hasil pewarnaan.
Langkah 3
Blot slaid dengan tuala kertas penyerap dalam satu arah dan tanpa menggosok. Pastikan bahagian bawah slaid bersih.
Langkah 4
Perhatikan bekas noda di bawah mikroskop. Mulakan dengan objektif yang paling jauh untuk mencari kawasan yang ingin anda perhatikan dengan lebih terperinci. Ubah objektif untuk lebih dekat dan dekat dengan sampel.
Pemerhatian
Untuk penggunaan objektif dengan pembesaran yang lebih tinggi (biasanya 100X), minyak rendaman harus digunakan, kerana ini membantu cahaya menembus lebih baik dan gambar kelihatan lebih tajam. Tidak perlu menggunakan selongsong.
Langkah 5
Akhir sekali, buang semua sampel di dalam bekas yang sesuai yang berlabel "biohazard" dengan betul.
Rujukan
- (2001). Aplikasi Mikrobiologi: Manual Makmal dalam Mikrobiologi Umum ( edisi ke- 8 .). Syarikat McGraw-Hill.
- Harisha, S. (2006). Pengenalan kepada Bioteknologi Praktikal (1 st ). Media Firewall.
- Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Pewarnaan awal bakteria: Noda sederhana. Protokol Semasa dalam Mikrobiologi, (SUPPL. 15), 1–5.
- Pommerville, J. (2013). Asas Alcamo ini Mikrobiologi Makmal (10 th ). Pembelajaran Jones & Bartlett.
- Prescott, H. (2002). Latihan Makmal dalam Mikrobiologi ( 5hb ). Syarikat McGraw-Hill.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Prinsip Mikrobiologi (1 st ). Pendidikan Tata McGraw-Hill.
