LACTOPHENOL BLUE: CIRI, KOMPOSISI, PENYEDIAAN, PENGGUNAAN - KIMIA - 2025

Yang biru lactophenol atau kapas biru disediakan dengan ciri-ciri pewarna tunggal. Ia digunakan di makmal klinikal untuk mewarnai struktur kulat seperti hyphae, tubulus kuman dan spora.

Ini membantu dalam diagnosis awal atau awal dari kulat tertentu, namun selalu disarankan untuk memperkuat diagnosis dengan ujian yang lebih spesifik, seperti ujian biokimia atau serologi.

Gambaran grafik noda biru laktofenol, noda smear dengan laktofenol biru, penyediaan yang dipasang pada mikroskop. Sumber: Public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Biru laktofenol terdiri dari asam laktat, biru anilin, gliserin, fenol, dan air deionisasi. Ia boleh disediakan di makmal atau boleh dibeli siap digunakan. Setelah siap, ia siap digunakan, tidak boleh dicairkan, kerana tindakan ini akan memberikan hasil yang mengerikan.

Kepekatan komponennya menjadikannya ideal untuk mengotorkan struktur kulat, kerana fenol menghilangkan mikrobiota bakteria yang menyertainya, sementara asid laktik menghasilkan filem pelindung di sekitar struktur kulat. Akhirnya, biru anilin mempunyai pertalian untuk mematuhi struktur kulat.

Asas

Dengan laktofenol biru, pewarnaan sederhana struktur kulat budaya mikologi tertentu dijalankan. Ia dipanggil sederhana kerana hanya menggunakan satu pewarna.

Laktofenol biru, selain daripada pewarnaan, juga bertindak sebagai penjelasan sampel, berkat tindakan bersama asid laktik dan fenol, di samping itu, fenol bertindak sebagai mordant dan pada masa yang sama mencegah lisis mikroorganisma dengan menghalang enzim hidrolitik yang mungkin hadir.

Manakala asid laktik memelihara morfologi struktur kulat.

Sebaliknya, biru anilin mempunyai sifat melekat atau mengikat struktur yang mengandung kitin. Strukturnya berwarna biru muda.

Perlu diingatkan bahawa dinding sel mikroorganisma kulat, terutama cetakan, mengandungi kitin, sebab itulah pewarna ini sangat sesuai untuk mengotorkan mikroorganisma ini.

ciri

Larutan biru laktofenol adalah pewarna berair yang sangat berasid, sedikit keruh, dengan warna biru muda. Ia tetap stabil jika disimpan antara 15 ° C hingga 25 ° C. Botol mesti disimpan dengan betul. Ia menjengkelkan dan menghakis kulit dan membran mukus.

Komposisi

Formula untuk menyediakan satu liter biru laktofenol adalah seperti berikut:

-250 g / L asid laktik

-1.0 g / L anilin biru atau metil biru

-500 g / L gliserin

-250 g / L fenol

-250 ml air suling atau suling.

Fenol dilarutkan dalam air yang telah dipanaskan sebelumnya. Asid laktik dan gliserin ditambah dan dicampurkan dengan baik. Akhirnya, biru anilin larut. Ia bercampur lagi dan siap digunakan.

Bahagian untuk menyediakan 80 ml larutan biru laktofenol adalah:

-20 g kristal fenol

-20 ml asid laktik

-40 ml gliserin atau gliserol

-20 ml air suling.

Gunakan

Ia digunakan untuk mengotorkan struktur kulat dan, melalui ciri-ciri morfologi yang diperhatikan pada tahap mikroskopik, dapat membuat diagnosis dugaan terhadap jamur.

Proses

Pewarnaan struktur kultur kulat

- Ambil budaya kulat tulen yang strukturnya harus diperhatikan.

- Sebaiknya bekerja di tudung aliran laminar, atau di bawah pemetik api, menggunakan topeng dan sarung tangan, kerana perlu mematuhi piawaian keselamatan biologi, kerana kebanyakan acuan mudah tersebar di persekitaran dan oleh itu mewakili bahaya untuk pengendali.

- Setetes biru laktofenol diletakkan di atas slaid.

- Potong persegi kecil pita pelekat berkualiti dan pasangkannya dengan hati-hati pada hujung pemegang platinum yang disterilkan dengan sejuk.

- Pemegang platinum didekati ke bahagian yang paling dangkal dari koloni kulat dan kulturnya disentuh dengan sangat hati-hati, tepat di mana pita pelekat berada.

- Kemudian dibawa ke slaid dan diletakkan tepat di titisan biru lactophenol, dengan berhati-hati bahawa pita itu dilanjutkan dengan sempurna dan dilincirkan dengan pewarna. Pemegang platinum dikeluarkan dengan lembut.

- Satu lagi titisan biru laktofenol diletakkan di atas pita dan selimut di atasnya. Jangan menggunakan tekanan terlalu banyak agar tidak merosakkan struktur kulat, kerana ia sangat rapuh. Pewarna harus dibiarkan bertindak selama kira-kira 3 hingga 4 minit.

- Selepas waktu ini, penyediaan siap diperhatikan di bawah mikroskop dalam pembesaran 10X atau 40X. Sekiranya pemerhatian 100X diperlukan, minyak rendaman harus digunakan.

- Struktur jamur, pada umumnya, berwarna biru, kecuali jamur dematiaceous yang akan mengekalkan warna coklat khas dari jenis jamur ini.

Pewarnaan spesimen biologi langsung

Sekiranya diperlukan untuk mengkaji sampel biologi langsung, seperti dahak, nanah, eksudat, rembesan, antara lain, ini perlu mempunyai prosedur awal untuk pembasmian sampel. Penyelesaian NaOH digunakan untuk ini.

Sekiranya sampel rambut, ini boleh dicelup secara langsung.

Beberapa rambut yang terkena (10 secara keseluruhan) diambil dari lesi tinea capitis yang disangka (kawasan alopecic) dan diletakkan di atas slaid (3 hingga 4 rambut setiap slaid). Beberapa tetes biru laktofenol diletakkan di atas dan segera ditutup dengan selimut.

Pegang slaid dengan forceps dan panaskan perlahan di atas pembakar. Untuk melakukan ini, buat 3 hingga 4 hantaran cepat melalui api. Perhatikan mikroskop pada suhu 40X dan cari spora di luar atau di dalam rambut (masing-masing ectothrix atau endothrix). Sekiranya perlu, masukkan minyak rendaman dan perhatikan pada suhu 100X.

Pewarnaan tiub kuman dalam pengenalan

Setelah menanam kalsium Candida albicans dalam serum manusia selama 2 hingga 4 jam pada suhu 37 ° C, sebahagian larutan diambil dan diwarnai dengan laktofenol biru. Penyediaannya diperhatikan di bawah mikroskop pada suhu 40X. Tiub kuman ada dan blastospora berwarna biru terang.

Lembaran Data Keselamatan Lactophenol

Persatuan Perlindungan Kebakaran Nasional (NFPA), menetapkan lembaran data keselamatan bagi bahan kimia dari segi risiko yang diwakilinya mengikut pelbagai aspek, ini dilambangkan oleh rombus berwarna dan angka antara 0- Empat.

Bahaya kesihatan dikenalpasti berwarna biru, mudah terbakar berwarna merah, ketidakstabilan atau kereaktifan berwarna kuning, dan bahaya khas berwarna putih.

Kesihatan

Risiko kesihatan yang ditimbulkan oleh laktofenol biru menurut NFPA adalah tahap 3. Ini bermaksud bahawa bahan tersebut sangat berbahaya apabila tertelan atau bersentuhan langsung dengan kulit atau mukosa.

Ia adalah bahan yang sangat menghakis dan menjengkelkan.

Sekiranya bersentuhan dengan kulit dan selaput lendir, ia menyebabkan luka bakar yang teruk.

Sekiranya tertelan ia boleh menyebabkan sakit kepala, kebingungan, kelesuan, tidak sedarkan diri, penangkapan pernafasan dan juga kematian.

Keradangan

Menurut NFPA, Lactophenol Blue dinilai Tahap 1 untuk mudah terbakar. Ini bermaksud bahawa ia terbakar hanya jika dipanaskan di atas 94 ° C.

Ketidakstabilan

Disenaraikan mengikut NFPA pada tahap 0 (sifar) untuk kereaktifan. Ini bermaksud bahawa ia tidak mempunyai risiko kereaktifan, iaitu bahan kimia stabil.

Bahaya khas

Ia tidak memberikan bahaya khas tambahan.

Rujukan

1. Makmal SAR. Biru Laktofenol. 2010. Terdapat di: labsar.com.
2. Makmal kimia klinikal gunaan. Biru laktofenol. 2015. Terdapat di: cromakit.es
3. Makmal Merck. Mikroskopi biru laktofenol dalam larutan. 2017. Tersedia di: Pengguna / Peralatan / Muat turun
4. Kad Kecemasan. Penyelesaian biru laktofenol untuk pewarnaan kulat. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Colombia. 2014. Terdapat di: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Teknik untuk mengotorkan struktur kulat dengan pewarna sayuran sebagai alternatif yang tidak mencemarkan. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Terdapat di: Redalyc.
6. Laboratorium Himedia. Lactophenol Cotton Biru. 2017. Boleh didapati dari: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Ujian Biokimia dan Teknik Pewarnaan untuk Pengenalpastian Mikroba. Science Direct, 2017; 61-73. Terdapat dari: Elsevier